化工儀器網
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規格 | 細胞形態 | 貨號 |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7510 |
細胞簡介：
小鼠表皮成纖維分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構，由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠表皮成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠表皮成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。
公司正在出售的產品：
亞鹽測定試劑盒（比色法）
唾液酸（SA）測定試劑盒（帶SA標準）（比色法）
小鼠組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai glomerular baseme membrane aibody (GBM) ELISA Kit 人抗腎小球基底膜抗體(GBM)試劑盒
Humanhydroxyproline,HypELISAKit 人羥脯(Hyp)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforACH(Humanacetylcholine)ELISAKit人乙酰
藥品阿斯巴塘(aspaame)含量酶連續循環反應比色法定量試劑盒20次
Mousephosphatidylserine,PSELISAKit小鼠0脂酰絲(PS)試劑盒規格：96T/48T
G蛋白偶聯受體44抗體
脫碘酶2抗體
IFNA4重組食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
Melamine/BSA 三聚胺與牛血清白蛋白偶聯物 1mgMelamine/BSA 三聚胺與牛血清白蛋白偶聯物
S100A8重組人 S100A8 / CAGA 蛋白 Protein
CARHSP1 Protein Human 重組人 CARHSP1 蛋白
VDR Protein Mouse 重組小鼠 VDR / NR1I1 蛋白
Melamine/BSA 三聚胺與牛血清白蛋白偶聯物 1mgMelamine/BSA 三聚胺與牛血清白蛋白偶聯物
CARHSP1 Protein Human 重組人 CARHSP1 蛋白
IFNA4重組食蟹猴 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
VDR Protein Mouse 重組小鼠 VDR / NR1I1 蛋白
S100A8重組人 S100A8 / CAGA 蛋白 Protein
小鼠表皮成纖維細胞大鼠環加氧酶2(COX-2)試劑盒 ，英文名： COX-2 ELISA Kit
Rabbit ai endothelial cell aibodies (AECA) ELISA Kit 兔抗內皮細胞抗體(AECA)試劑盒
登革熱病毒通用型(DFV-U)核酸試劑盒(-PCR法) 48T
CLIAKitformouseIgMELISAkit小鼠免疫球蛋白IgM
體液還原型(GSH)濃度熒光定量試劑盒50次
ELISAKitCⅠCP人Ⅰ型前膠原C末端肽
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
化工儀器網