客戶之聲
諾伯特·蓋特曼博士
杜塞爾多夫大學醫院
大學癌癥中心(University Cancer Center、UTZ) 專務理事
血液內科、腫瘤科、臨床免疫科 高級醫師
杜塞爾多夫大學癌癥中心(University Cancer Center、UTZ) 專務理事。主要以被稱為MDS(骨髓異常增生綜合征)的白血病前期病癥為中心研究惡性骨髓疾病。另外,基于MDS的特定形態中發現有核紅細胞(成熟的紅血球前體細胞)的線粒體中存在明顯的鐵過剩現象,對鐵代謝相關的特定問題也具有研究興趣。
杜塞爾多夫大學醫院具有30年以上的MDS研究歷史。擁有大量MDS注冊病歷的該大學醫院,將長期對疾病的經過進行詳細記錄作為重點,在這類疾病的病理學、診斷、風險評估中已成為重要的研究基礎。蓋特曼博士等長年收集大量的骨髓及血液樣本,并將其保管在MDS病歷的生物材料數據庫中。并通過數據庫內信息,在分子生物學層面上進行分析。
骨髓鉆孔活組織檢查或三維細胞培養的組織微陣列,在顯微鏡觀察中是特別困難的課題
1. 鐵粒幼細胞性貧血的病理
2. 三維細胞培養中骨髓異常增生綜合征的病理
3. 醫藥品開發:NEDD化抑制劑
MDS作業團隊由碩士課程的學生2名、研究醫生1名、BTA(生物學技術助理)1名組成。
蓋特曼博士說道“試用熒光顯微成像系統BZ系列后,被其超高的性價比,以及豐富的模塊帶來的可擴展性所折服。像我們這樣的小規模作業團隊也可從財團獲得資金而得以購買,而表示衷心感謝。相信可逐步擴充新的模塊"。
團隊中負責對3種血液腫瘤進行細胞級別研究的成員,已將正置熒光顯微成像系統作為標準器械使用,成功實施了使用最多7個熒光染料的Opal多重IHC實驗。但是,該顯微鏡無法滿足他們的各種需求,這是導入熒光顯微成像系統BZ系列的原因之一。
該團隊獨立開發出MDS骨髓鉆孔活檢查TMA(組織微陣列)。該TMA包括AML(急性骨髓性白血病)患者的組織和正常對照組的組織進行對比。評價TMA相關免疫組織化學研究時,熒光顯微成像系統BZ系列的一大優點在于,可將TMA上的一個樣本或多個樣本匯總至1張圖像。
蓋特曼博士說道“要在1張圖像中顯示2 mm的核,圖像拼接功能尤其重要"。
圖像拼接功能對骨髓前體細胞的in vitro培養評價也有效。例如,準備以有核紅細胞的線粒體為目標結構進行研究時,熒光顯微成像系統BZ系列的一大優點當然是倒置的光路,由此能夠輕松進行細胞培養的定位與評價。另外西蒙·布里爾(BTA)補充說道。“這個顯微鏡和軟件可以讓觀察更加直觀。使用分析軟件,可通過各種方法輕松地快速處理圖像"
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鐵粒幼細胞性貧血是指,在紅血球生成前體細胞的線粒體中過度蓄積大量鐵的特殊MDS。該疾病從1950年代開始被人知曉,但其機制仍不明確。若干年前發現75至80%的鐵失利用性貧血患者存在SF3B1基因的剪接體變異。就是說,線粒體吸收鐵后,被稱為亞鐵螯合酶的酶無法將鐵高效吸入原卟啉,導致鐵大量蓄積在線粒體基質。最終導致血紅素合成驟減。如果沒有血紅素,細胞就會發出“鐵不足"的信號,導致線粒體中的鐵過剩進一步加劇。過剩的鐵使線粒體發生氧化、損傷。
為了探究鐵與卟啉無法順利結合的原因,蓋特曼博士正在研究線粒體內膜或基質的蛋白質相互作用。使用熒光顯微成像系統BZ系列,通過PLA(鄰位連接技術)將蛋白質間相互作用可視化為熒光信號,檢查膜復合體中是否有構造異常。另外使用光學切片功能,還可獲得無熒光模糊的清晰圖像。僅抽取來自各對焦平面的信號,可創建全幅對焦圖像。作為研究對象的蛋白質相互作用中,有亞鐵螯合酶與“線粒體血紅素代謝復合體"的相互作用參與,其中一部分是過渡性物質。
研究醫生法蒂梅·馬蒂迪回憶道,“訪問波恩的作業團隊時,偶然看到了BZ系列的展示。立刻被這個小型裝置所具有的各種功能所折服"。
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蓋特曼博士及其團隊,為了確認骨髓前體細胞的運動,目前已在研究室確立了三維細胞培養技術。以往只能進行普通的二維集落分析實驗。三維培養是造血前體細胞在半固體培養基中形成集落,并在該狀態下進行研究的方法。但是,三維細胞培養對顯微鏡的要求更高,由此熒光顯微成像系統BZ系列的Z棧功能及圖像拼接功能、光學切片功能得以發揮真正價值。這些功能成為導入熒光顯微成像系統BZ系列的決定因素。蓋特曼博士等針對三維細胞培養的免疫組織化學及核染色、DNA-RNA混合構造的檢測等用途,正在開發新的可視化方法。
對于還未充分驗證效果的NEDD化抑制劑,當前正在進行臨床試驗。蓋特曼博士的團隊正在研究該新藥對造血前體細胞及其分化產生哪些影響。其中EGFR(表皮生長因子受體)的PLA(鄰位連接技術)檢測細胞表面的受體同源二聚化,其結果是在細胞內部發生受體的磷酸化反應,從而充當細胞增殖時的信號的效果。在進行采訪時,由于初期結果還沒有發表,因此無法提供更準確的信息。
對于蓋特曼博士的作業團隊來說,熒光顯微成像系統BZ系列的導入是重大的進步。在杜塞爾多夫大學內的過渡項目中其他研究人員也將使用BZ系列。
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