真空手套箱主要由主箱體、過渡室兩部分組成。如用戶有其它特殊要求，也可以根據需要進行設計制造。
主箱體上有兩個(或兩個以上)手套操作接口，分布在箱體的前邊(或前后兩邊)，這使得本操作箱能被一個(或幾個)人同時操作，提高了箱體的使用效率。
另外，在箱體的前面(或前后)都有觀察窗，操作者能夠清楚地觀察到箱體內的操作過程，使得操作過程直觀地展現在操作者的眼前。
過渡室的閥門上有抽氣與充氣接嘴，在需要抽氣或充氣時可由此接入。主箱體上也安裝有閥門和接嘴，用戶在需要維持氣壓平衡而對主箱體放氣或充氣時可以使用(手套口之間的三通閥必要時也可以用來放氣)。
主箱體的前觀察窗上方安裝了照明日光燈。過渡室是作為主箱體與箱體外的過渡空間，是由二個密封門和二個閥門以及一個室體組成。內外二個門能夠有效地隔絕主箱體與外界的聯系，使得箱體內外的東西能夠在主箱體與大氣隔絕的情況下進出，從而避免了反復對主箱體抽真空與充氣的麻煩。
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