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臺盼藍溶液0.4%

產(chǎn)品貨號：C0040

儲存條件：4℃，12個月

產(chǎn)品性質(zhì)

別名：錐藍或錐蟲藍

分子式：C34H24N6Na4O14S4

分子量：960.81

CAS:72-57-1

產(chǎn)品描述

臺盼藍是一種陰離子型染料。Trypan blue不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色，即產(chǎn)生所謂的拒染現(xiàn)象,而死亡細胞的細胞膜通透性增加，可使染料通過細胞膜進入細胞內(nèi)，使死細胞著色呈藍色，是常用的檢測細胞活率的方法。通常認為細胞膜完整性喪失，即可認為細胞已經(jīng)死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養(yǎng)中常用的死細胞鑒定染色方法之一。

Trypan blue stain(0.4%)常用于檢測細胞膜的完整性以及細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色，而死細胞會被染成淡藍色。臺盼藍可被巨噬細胞吞噬，故可用于巨噬細胞的活體染色劑。臺盼藍染色后，通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù)，就可以對細胞存活率進行比較精確的定量，0.4%為常用的濃度。

自備材料：PBS   細胞ji數(shù)板 顯微鏡

參考步驟

1、收集細胞:

如為貼壁細胞，應(yīng)用yi蛋白酶- EDTA溶液消化細胞，收集細胞。

如果收集懸浮細胞，則可以直接收集細胞。收集好的細胞在1000~ 2000g離心1min , 棄上清，用1mIPBS重新懸浮細胞沉淀。

2、臺盼藍染色:

吸取100μl細胞懸液到1.5ml或0.5ml離心管內(nèi),加入100μl Trypan blue stain(0.4%)輕輕混勻，靜置染色3min(染色時間可適當(dāng)延長，但不宜超過10min)。

3、細胞計數(shù):

吸取經(jīng)過染色后的細胞，用血細胞ji數(shù)板計數(shù)。通常如果要比較精確地進行定量，每個細胞樣品至少需要數(shù)500個細胞,數(shù)出藍色細胞和細胞總數(shù)。細胞存活率計算公式如下:

細胞存活率= (細胞總數(shù)-藍色細胞數(shù))/細胞總數(shù)x 100%

注意事項

1、Trypan blue stain對人體有輕微毒性,請注意小心防護。

2、注意凋亡小體偶爾也有臺盼藍拒染現(xiàn)象。

3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。