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懸浮細胞小核酸轉染試劑
  • 懸浮細胞小核酸轉染試劑
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貨物所在地:北京北京市

更新時間:2025-04-15 21:00:08

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懸浮細胞小核酸轉染試劑能夠高效轉染絕大多數懸浮細胞,獲得比較理想的基因敲除效果。對于大多數懸浮細胞,LabFect 的細胞轉染陽性率都在 75%以上,而轉染細胞死亡率不到10%。LabFect 的使用也極其簡便,先將 sRNA 與 LabFect 室溫混合,再將siRNA-LabFect 混合物直接加入含培養基的細胞,血清對轉染效果沒有影響,不必刻意添加或更換培養液。

LabFect SP懸浮細胞小核酸轉染試劑

貨號T1024

存儲條件藍冰運輸,4°C 保存,超一個月不用于-20°C儲存,-20℃保存條件下,有效期為 1 年。避免反復凍融。

產品特點:

卓yue的懸浮細胞轉染性能:細胞轉染陽性率一般在75%以上,基因敲除效率在80%以上;

極低的細胞毒性:轉染細胞死亡率不到10%,大大降低了因細胞毒性對實驗結果的影響;

轉染細胞范圍廣,絕大多數懸浮細胞都能獲得比較理想的轉染結果。

產品介紹

LabFect 可用來轉染 siRNA、miRNA mimics、miRNA inhibitor 等 200bp 以內的小分子 RNA,可轉染絕大多數懸浮細胞。目前, 無論國外還是國內,懸浮細胞的核酸轉染都是個熱點難題,市場還缺乏真正有效的商品化的懸浮細胞小核酸轉染試劑。LabFect 能夠高效轉染絕大多數懸浮細胞,獲得比較理想的基因敲除效果。對于大多數懸浮細胞,LabFect 的細胞轉染陽性率都在 75%以上,而轉染細胞死亡率不到10%。LabFect 的使用也極其簡便,先將 sRNA 與 LabFect 室溫混合,再將siRNA-LabFect 混合物直接加入含培養基的細胞,血清對轉染效果沒有影響,不必刻意添加或更換培養液。

應用

siRNA 轉染

antisense RNA 轉染

200bp 內的小分子 DNA 轉染


質量控制

本產品經嚴格的質量檢驗證明,無生物污染。

操作步驟:本說明書適用于24孔培養板的轉染實驗,其他規格的培養板的用量參照下面表格,表格給出的是每孔的用量與體積。

1. 細胞接種:轉染前一天接種細胞,每孔500 μl培養基,使細胞在轉染時密度在30-50%,盡量不要使用抗生素

2. siRNA-Labfect SP混合物準備:

2.1 6pmol siRNA 用 50μl 無血清培養基稀釋。

2.2 2μl Labfect SP用 50μl 無血清培養基稀釋。輕輕混勻,室溫孵育 5min。

注意:確保在 25 min 內執行第三步操作,不要過于延遲。  

2.3 孵育 5min 后,將 siRNA 稀釋液與 Labfect SP稀釋液混合(總體積 100μl)。輕輕混勻,室溫孵育 20 min。

3. 將混合物加到培養的細胞內(*培養基培養):

3.1 100μl混合物加入培養孔內,培養孔內含有 0.5ml 培養的細胞。輕輕晃動培養板 5min,混勻。

3.2  37°C培養48-72h,檢測基因抑制效果。如果需要,細胞培養4-6h時可以更換培養基,但不是必須。孵育時間的長短,取決于細胞類型、 所干擾基因本身及分析方法。可設置不同的孵育時間進行實驗以確定最jia孵育時間。

注意事項:

1. 懸浮細胞轉染難度較大,首ci轉染時,請務必對轉染條件進行優化。例如:24 孔培養板,可進行如下交叉實驗:

LabFect

siRNA(pmol)

2ul

20、30、40、50

3ul

20、30、40、50

4ul

20、30、40、50

2. 轉染時,細胞生長狀態應保持良好,密度不能過大,培養液盡量不要使用抗生素,否則會導致細胞死亡增加。

3. 為了提高轉染效率,轉染后培養板可放于微型振蕩器上培養或每隔 1 小時人工晃動 1 次。

LabFect Transfection Reagent Formats for Various Cell Culture Vessels

Surface area/well

Vol. of growth medium

Vol. of dilution medium

siRNA Amount

LabFect


(cm2)

(µl)

(µl)

(pmol)

(µl)

96-well

0.3

100

2 x 10

      6

0.6

48-well

0.8

250

2 x 25

15

1.5

24-well

         2

500

2 x 50

30

  3

12-well

        4

1000

2 x 100

60

   6

6-well

10

2500

2 x 250

150

15



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