目錄:柏萊源(天津)生物科技有限公司>>生物試劑>>試劑盒kit>> HG-VE001Vero殘留DNA檢測試劑盒
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100 Reactions |
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應用領域 | 生物產業,制藥/生物制藥 |
貨號:HG-VE001
產品簡介:
Vero 殘留 DNA 檢測試劑盒是用于定量檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中 Vero 宿主細胞 DNA 殘留量的專用試劑盒。本試劑盒利用 TaqMan 熒光探針原理,定量檢測樣本中 Vero 殘留 DNA。檢測快速,專一性強,性能可靠,最-低檢測限可以達到 fg 水平。
試劑盒配套的 Vero DNA 定量參考品,已溯源至國家標準品。
本試劑盒的檢測范圍為:3fg/uL~3x105fg/uL。
100 Reactions
組分裝量 | 裝量 | 儲存條件 |
2×qPCR Reaction MIX | 1.6mL×1管 | -20℃及以下避光保存 |
Vero Primer&Probe MIX | 550μL×1管 | |
定量參考品1(3×10?fg/μL) | 300μL×1管 | |
定量參考品2(3×10?fg/μL) | 300μL×1管 | |
定量參考品3(3×103fg/μL) | 300μL×1管 | |
定量參考品4(3×102fg/μL) | 300μL×1管 | |
定量參考品5(3×101fg/μL) | 300μL×1管 | |
定量參考品6(3fg/μL) | 300μL×1管 | |
DNA稀釋液 | 1mL×3管 |
規定儲存條件下 12 個月。
◆ ABl QuantStudio 3 qPCR 儀
◆ 羅氏LC96 Real-Time PCR System
◆ AB1 7500 Real-Time PCR System
◆ 伯樂 CFX Opus96 Real-Time PCR System
◆ 鯤鵬ArchimedTM X Real-Time PCR System
◆熒光定量 PCR 儀
◆ 1000uL,100uL,10uL移液槍
◆ 1.5mL 無菌離心管
◆ 1000μL,100uL,10μL無菌低吸附帶濾芯吸頭
◆ 無菌無酶八聯管或 96 孔 qPCR 板
1、根據所需檢測的標準樣品和待測樣品數量(一般做3 組復孔),計算反應所需孔數:
反應孔數=(6 組參考品+1個無模板對照 NTC+待測樣品)x3
2、根據反應孔數計算本次所需的 Vero qPCR MIX 總量:
Vero qPCRMIX=(反應孔數+2或3)x20uL(2 或3為操作損失量)
3、將所用試劑置于冰上融化,輕微振蕩混勻,按下表所示配制Vero qPCR MIX:
組分 | 單孔反應(μL) |
2 x qPCR Reaction MIX | 15 |
Vero Primer & Probe MlX | 5 |
4.將所需試劑置于冰上融化,輕微振蕩混勻,按下表所示加樣(總體積 30uL):
模板 | 模板量 | 所需qPCR MIX量 |
參考品 | 參考品1-6各10μL | 20μL |
無模板對照NTC | DNA稀釋液各10μL | 20μL |
待測樣品 | 待測樣品各10μL | 20μL |
以 BIO-RAD 公司 CFX96 qPCR 儀為例。
1、設置反應程序:
2、創建實驗反應板,點擊 Select Fluorophores 選擇熒光 FAM;在反應板圖表中,選擇樣品孔,在 Sample Type 中下拉選擇 Unknow,勾選熒光 FAM,Target Name 命名為 Vero;輸入每個樣品的重復次數及 Sample Name。
在反應板圖表中,選擇標曲孔,在 Sample Type 中下拉選擇 Standard,勾選熒光 FAM,Target Name 命名為 Vero;輸入每個稀釋梯度的重復次數及SampleName。并且分別在STD1,STD2,STD3,STD4,STD5,STD6的Concentration 一欄賦值為 300000、30000、3000、300、30、3(單位為fg/uL)。
3、點擊 Run 界面的“Start Run"按鈕進行 PCR 測定。
Stage1 | 污染消化 | Reps:1 | 50℃ | 2min |
Stage2 | 預變性 | Reps:1 | 95℃ | 20s |
Stage3 | 循環反應 | Reps:40 | 95℃ | 3s |
60℃ | 30s |
程序 Stage3 中 60°C 30s處設置為熒光收集
以BIO-RAD公司CFX96 qPCR儀為例
1. 點擊資料分析視窗Quantitation,可讀取標準曲線的斜率(Slope)、截距(Intercept)、擴增效率(Effect)、R2。
2. 在視窗Quantitation Data 中,SQ Mean 一欄可讀取無模板對照NTC、NCS、待測樣本的檢測值,單位為fg/μL。
3. 陰性對照 NTC和 NCS 的 CT值都應大于標曲最-低濃度的 CT值或根據實驗室自身驗證結果設定標準。
1. 本試劑盒已通過穩定性(凍融等因素)的驗證,無需分裝。
2. 陰性樣品和陽性樣品(參考品和待測樣品等)的配制環境需區分區域,不可在一個區域內操作,配制人員需穿戴整齊,戴好口罩、手套和穿好潔凈服。
3. 注意在不同加樣步驟間及時更換吸頭,避免交叉污染,避免長時開蓋。
4. 試劑盒必須在有效期內使用。
5. 試劑盒內所有組分建議在低溫環境融化后使用。
6. 只有嚴格遵守說明書的操作方法,全部使用本試劑盒配套的試劑才能保證優良檢測效果。
7. 盡量在當天完成樣本前處理純化后立即進行后續qPCR檢測,以保證檢測結果的準確性。
8. 最終的試驗結果與試劑的有效性、操作者的操作方法及試驗環境密切相關。
9. 公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。
10. 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷。
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效期保障:嚴格把控產品質量,確保試劑效期新鮮,保障實驗結果的可靠性。
專業技術支持:提供詳細的實驗方案和技術指導,幫助用戶優化實驗條件,提高實驗成功率。
定制化服務:根據用戶需求,提供個性化的產品和服務解決方案。
售后保障:完善的售后服務體系,及時解決用戶在使用過程中遇到的問題。
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