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賽默飛Varioskan LUX酶標儀簡介與使用說明
一、儀器概述
Varioskan LUX是賽默飛公司推出的一款多功能光學檢測系統,屬于多模式酶標儀。它支持多種檢測模式,包括吸光度(Absorbance)、熒光強度(Fluorescence Intensity)、時間分辨熒光(Time-Resolved Fluorescence, TRF)、發光(Luminescence)、熒光偏振(Fluorescence Polarization, FP)以及AlphaScreen/AlphaLISA等技術。適用于生物化學、細胞學、分子生物學等研究領域的數據采集和分析。
Varioskan LUX采用模塊化光學系統,結合自動化功能、觸控操作界面和軟件平臺SkanIt,滿足科研與高通量檢測需求。其設計強調用戶體驗簡化與操作靈活性,適配多種微孔板格式(96孔、384孔、1536孔)以及單管檢測。
二、基本原理
Varioskan LUX的工作基于光學檢測原理。不同檢測模式對應不同的光源、探測器與光路設置:
吸光度測量:通過測量樣品對入射光的吸收程度,反映樣品中物質濃度。使用氙燈為光源,結合可變波長單色器進行波長掃描。
熒光檢測:熒光探針在激發光作用下發出特定波長的發射光,儀器通過濾光或單色器檢測其強度。適合用于蛋白標記、核酸檢測等實驗。
時間分辨熒光(TRF):利用發光延遲特性,提高信噪比,常用于稀有元素標記(如銪)的免疫分析。
發光檢測:無需激發光源,直接檢測化學反應或生物發光產生的光信號,常用于酶促反應或細胞活性分析。
AlphaScreen技術:基于供體和受體微珠間的能量傳遞,實現無洗滌的高靈敏度檢測。
三、儀器組成
Varioskan LUX主要由以下部分構成:
檢測光學系統:包含氙燈、LED光源、單色器、濾光片、探測器等,用于實現多模式檢測。
微孔板模塊:自動托盤系統支持多種孔板格式,并可進行控溫(室溫至+65°C)與震蕩功能。
自動化接口:支持機械臂對接,實現自動進板和連續檢測。
控制界面:配有內置觸控屏,可本地設置參數或通過SkanIt軟件在計算機端控制。
數據分析系統:SkanIt軟件支持實驗設計、數據采集、計算、標準曲線擬合及報告輸出。
四、操作流程
1. 儀器準備
開機與自檢:連接電源與計算機,開啟主機,儀器自動進行系統自檢,檢查光源、機械托盤與溫控系統狀態。
軟件初始化:啟動SkanIt軟件,確認儀器已連接,并進入實驗設置界面。
2. 實驗設置
用戶需在軟件中進行以下設定:
板型選擇:選擇使用的孔板格式(如96孔、384孔)。
檢測模式選擇:根據實驗類型設定吸光度、熒光、發光等檢測方式。
波長選擇:輸入所需激發波長與發射波長(對于熒光模式),或測量波長(對于吸光度)。
讀取參數設置:如讀取高度、讀取次數、讀取順序等。
溫控設置(如需要):設定孵育溫度及持續時間。
震蕩模式:選擇線性、軌跡式或雙向震蕩,并設定持續時間與速度。
3. 樣品準備與裝載
將樣品加至孔板中,避免邊緣效應與氣泡影響。
將孔板正確放入托盤,確保方向一致(A1孔朝左上)。
在軟件中點擊“讀取",儀器自動啟動檢測。
4. 數據采集與分析
檢測過程中,實時顯示原始數值或信號曲線。
軟件可進行標準曲線構建、濃度計算、數據校正與歸一化處理。
支持多組重復實驗、平均值計算與標準差統計。
數據可導出為CSV、Excel、PDF等格式,并可自定義報告模板。
五、主要功能與技術參數
功能/參數 | 說明 |
---|---|
吸光度波長范圍 | 200–1000 nm(步長1 nm) |
熒光激發/發射波長范圍 | 200–850 nm |
兼容板型 | 6–1536孔板,兼容定制格式 |
溫控范圍 | 室溫至65°C,可編程恒溫 |
檢測速度 | 96孔板約15秒,384孔板約1分鐘 |
發光檢測動態范圍 | 10^9 以上 |
自動化接口 | 支持LIMS系統與機械臂對接 |
軟件功能 | 曲線擬合、條件篩選、統計分析、多語言支持 |
六、應用領域
Varioskan LUX廣泛應用于多個研究方向:
細胞生物學:細胞活力檢測、凋亡分析、熒光標記蛋白研究。
免疫檢測:ELISA、AlphaLISA、高靈敏抗體篩選。
基因分析:熒光定量PCR前期反應驗證、核酸雜交實驗。
藥物篩選:高通量篩選化合物對酶或受體的作用。
環境檢測:污染物光學信號檢測、化學反應動力學研究。
七、日常維護與注意事項
1. 日常維護
每日開機前檢查濾光系統與托盤是否干凈。
使用完畢后關閉光源,避免長期曝光。
定期清潔檢測窗口與板托,避免液體殘留。
每季度檢查校準狀態,必要時聯系廠商進行專業校準。
2. 注意事項
使用前詳細閱讀使用手冊,熟悉各項安全規定。
在使用高敏模式時,盡量避免環境光干擾。
樣品體積需滿足檢測要求,避免低液面干擾。
切勿在運行中強行取出板托,避免損傷機械系統。
八、故障排查簡表
問題 | 可能原因 | 解決方法 |
---|---|---|
不啟動/死機 | 電源未接穩、系統崩潰 | 檢查插頭,重啟軟件 |
光源不亮 | 燈泡壽命耗盡或松動 | 更換燈泡或重新安裝 |
讀數波動大 | 孔板氣泡、樣品未混勻 | 去除氣泡,重做實驗 |
軟件無法識別儀器 | USB端口故障、驅動未更新 | 更換端口或更新驅動 |
九、總結
Varioskan LUX酶標儀作為一款多模式光學檢測平臺,適配多種科研與應用場景。其檢測模式全面,操作界面友好,數據處理功能豐富,適合從基礎研究到高通量篩選的多種實驗需求。正確掌握儀器功能、規范操作流程、按時進行維護,有助于確保數據準確性與實驗穩定性。
如需更高級的使用技巧,如腳本自動控制、結果批處理、復雜曲線擬合等,建議參考SkanIt高級手冊或參加相關技術培訓,以充分發揮該系統的性能。