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產品簡介：

豬流感是由豬流感病毒（SIV）引起的一種急性高度接觸傳染性豬呼吸道疾病，臨床以突發、高熱、咳嗽、  呼吸困難、衰竭、高發病率、低死亡率為特征。目前已發現的 SIV  至少有 9  種不同的血清亞型。H1H1  型豬流感是廣泛流行于豬群流感之一。 

本試劑盒適用于檢測的肺臟、氣管分泌物、鼻-拭子樣品等標本中豬流感 H1N1 病毒 RNA，適用于豬流感病毒感染的輔助診斷。 

產品特點：

一、嚴格的質控體系

所有試劑盒從原料到成品都經過嚴格的質量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩定可靠的質量，讓您的檢測結果更可信。

二、高靈敏度

產品經過不斷優化，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的豬流感H1N1病毒核酸，不放過任何潛在的感染風險。

三、便捷操作

綜合各項指標特性，研發出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手。

四、多樣的檢測驗證樣本

該試劑盒經過多種樣本的檢測驗證，適用于肺臟、氣管分泌物、鼻-拭子等多種常見樣本，滿足不同的檢測需求。

五、個性化定制服務

專業的研發團隊可為您提供個性化的定制服務，根據您的特殊需求進行產品優化和調整，為您提供更貼合實際的檢測方案。

六、豐富的產品線

除了豬流感H1N1病毒（SIV-H1N1）雙重PCR試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領域的檢測需求。

七、完善的售前售后服務

我們擁有完善專業的售前售后服務團隊，在您購買前為您提供詳細的產品咨詢和技術支持，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂。

產品參數：

產品規格

50T/盒，可滿足一定規模的檢測需求。

檢測方法

實時熒光PCR，具有快速、準確、靈敏等優點。

適用儀器

ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

標本采集

病死豬，取肺臟、氣管分泌物；待檢活豬，用棉拭子深入鼻腔取分泌物，置于 1mL 50%甘油生理鹽水中。

保存和運輸

采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應不超過 24 h；若需長期保存，應放置-70℃以下保存，凍融不超過 3 次。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區） 

1.1樣本前處理 

組織樣品：稱取樣品約 1g，剪碎混勻后于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續研磨，待勻漿后轉至1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中；氣管、鼻腔分泌物取 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。 

1.2核酸提取 

推薦采用公司生產的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進行核酸提取，請按照試劑說明書進行操作。 

2.試劑配制（試劑準備區） 

根據待檢測樣本總數，設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照；反應管數每滿 10 份，多配制 1 份)，每測試反應體系配制如下表： 

試劑 SIV-H1N1 反應液 酶液 

用量 19μL1μL

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中，20μL/管。 

3.加樣（樣本處理區） 

將步驟 1 提取的 RNA、陽性質控品、陰性質控品各取 5μL，分別加入相應的反應管中，蓋好管蓋，混勻， 短暫離心。 

4.PCR 擴增（核酸擴增區） 

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內； 

4.2設置好通道、樣品信息，反應體系設置為 25μL；熒光通道選擇： 

檢測通道（Reporter Dye）FAM、ROX， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，請勿選擇 ROX 參比熒光。 

4.3推薦循環參數設置： 

5.結果分析判定 

步驟 循環數 溫度 時間 收集熒光信號 

11 cycle50℃ 10min否 

21 cycle95℃ 2min否 

345 cycles95℃ 15sec否 

60℃ 30sec是 

5.1結果分析條件設定（請參照各儀器使用說明書進行設置，以分析 ABI7500 儀器為例） 

反應結束后自動保存結果，根據分析后圖像調節 Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據實際情況自行調整，Start 值可設在 3～15、End 值可設在 5～20，使閾值線位于擴增曲線指數期，陰性質控品的擴增曲線平直或低于閾值線），點擊 Analyze 自動獲得分析結果。 

5.2結果判斷 

FAM 通道為豬流感 H1N1 病毒 H1 基因檢測結果，ROX 通道為豬流感 H1N1 病毒 N1 基因檢測結果。陽性：檢測通道 Ct 值≤40，且曲線有明顯的指數增長曲線； 

陰性：樣本檢測結果 Ct 值>40 或無 Ct 值。 

5.3質控標準 

陰性質控品：無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示； 

陽性質控品：擴增曲線有明顯指數增長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。 

6.檢測方法的局限性 

1.樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關； 

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現假陽性結果； 

3.陽性對照、擴增產物泄漏，會導致假陽性結果； 

4.病原體在流行過程中基因突變、重組，會導致假陰性結果； 

5.不同的提取方法存在提取效率差異，會導致假陰性結果； 

6.試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現假陰性或定量檢測不準確的結果； 

7.本檢測結果僅供參考，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。 

注意事項：

1.所有操作嚴格按照說明書進行；

2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化，完-全混勻并短暫離心；

3.反應液應避光保存；

4.反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區專用工作服；

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進行，以免交叉污染；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；

8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫學實驗室生物安全通則》進行處理。

9.本產品僅供科研。

選擇我們的豬流感H1N1病毒（SIV-H1N1）雙重PCR試劑盒，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！