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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

一個(gè)細(xì)胞所含的所有轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物又叫轉(zhuǎn)錄組 Transcriptome，對(duì)其進(jìn)行二代測(cè)序是研究基因表達(dá)的最新方法，但是很多樣品（FACS 分離的細(xì)胞、FFPE 切片或少量細(xì)胞樣品）細(xì)胞數(shù)量有限，質(zhì)量不高，并且還沒法進(jìn)行第二次取樣，所以常常需要先進(jìn)行全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增 Whole Transcriptome Amplification。WTA的方法之一是 T7 轉(zhuǎn)錄法，它既可以得到反義 aRNA（Antisense Amplified RNA），也可以再以反義 aRNA 為模板繼續(xù)得到正義 aRNA。其制備反義 aRNA 的原理圖如下：

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.即開即用，用戶不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每個(gè)成分并進(jìn)行優(yōu)化。

2.只需要半天即可制備反義 aRNA（相當(dāng)于 mRNA 的互補(bǔ) RNA 鏈），只要一天即可制備正義 aRNA（相當(dāng)于 mRNA）。

3.以 50ng mRN 為模板一般能制備 10ug 左右的、長(zhǎng)度在 200-1500bp 之間的反義 aRNA；以 50ng aRNA 為模板一般能制備 40ug 左右的、長(zhǎng)度在200-1000bp 之間的正義 aRNA。

4.能保持 RNA 樣品中各分子的相對(duì)豐度， Pearson 相關(guān)性系數(shù)一般在0.9-0.95 以上（跟起始模板用量、制備的是反義還是正義 aRNA 相關(guān)）。

5.體外轉(zhuǎn)錄時(shí)加入自備的標(biāo)記 UTP，可以制備標(biāo)記的 aRNA。

6.擴(kuò)增得到的單鏈 RNA 能直接用于各種后續(xù)試驗(yàn)，包括 NGS、qRT-PCR、芯片表達(dá)分析、雜交反應(yīng)等。

7.本產(chǎn)品足夠做 20 次全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增（制備反義 aRNA 算一次，再制備正義aRNA 算兩次）。

8. 全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒（T7 法）只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

本產(chǎn)品使用塑料袋包裝，含兩個(gè)部分第一部分無包裝

名稱編號(hào)規(guī)格包裝

微量核酸沉淀劑10mL10mL 本色瓶?jī)?nèi)

使用手冊(cè) 1 份無

第二部分用 10 孔盒包裝

名稱編號(hào)規(guī)格包裝

cDNA 第一鏈合成反應(yīng)液

（含 dNTP）40 μL0.5 mL 綠蓋管

T7-Oligo-dT 引物干粉20 此1.5mL 本色管

MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶，200U/μL20 μL0.5 mL 紅蓋管

5×cDNA 二鏈合成緩沖液160 μL0.5 mL 白蓋管

20×cDNA 二鏈合成酶混合液40 μL0.5 mL 黃蓋管

E.coli 外切酶 I，20U/μL40 μL0.5 mL 紅蓋管

微量核酸沉淀劑10mL10mL 本色瓶?jī)?nèi)

2×T7 體外預(yù)配液

0.5 mL0.5 mL 綠蓋管

T7 RNA 聚合酶-RI 混合液

50 μL0.5 mL 紅蓋管

RNase-free 水1 mL1.5 mL 藍(lán)蓋管

保存和運(yùn)輸

低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期為 1 年。

自備試劑

75%乙醇，RNA 純化試劑盒，RNase-free DNase

選擇我們的全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒（T7 法），就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！

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