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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 250ml |
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貨號 | XY-D-1654 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Bacterial Endotoxin Erasol |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 12個月 |
產品簡介:
內毒素(即 lipopolysaccharides,LPS)是 E.coli 細胞壁的主要成分,傳統的去除內毒素的方法是將內毒素和 DNA 一起純化出來,然后再用各種方法去除其中的內毒素,操作繁瑣,DNA 回收率低。本產品可以直接把 E.coli 表面的內毒素去除,從根本上避免了內毒素對后續操作(如質粒 DNA 提取,重組蛋白質提取)的污染。
產品特點:
1.首-個在菌體收集階段去除內毒素的產品,從源頭上避免了內毒素跟 DNA 和胞漿蛋白的接觸,從根本上防止了可能產生的污染。
2.操作簡單快速,用酶溶液溫和清洗菌體 3-4 次即可去掉細菌表面的內毒素,只需要 10 分鐘左右時間,不需要復雜儀器設備。
3.高效,能去除 99%以上的內毒素。
4.跟各種質粒 DNA 提取、基因組 DNA 提取和蛋白質提取等操作兼容,DNA 丟失率只有 10%左右(其他方法 DNA 丟失率可以高達 50%)。
5.不影響 DNA 和絕大部分蛋白質的活性,處理過的質粒 DNA 可用于轉染實驗。
6.既可小規模使用(在 1.5 mL 離心管內),也可放量用于大規模無內毒素質粒 DNA 提取和無內毒素蛋白質純化。
產品參數:
產品規格
成 份 規格包裝
菌體內毒素清除劑250 mL250 mL 本色瓶
使用手冊1 份無
保存和運輸
常溫運輸和保存,有效期一年。
自備試劑
無
使用方法:
一:用于菌液小于 3 mL 的樣品
1.收集 1.5-3 mL E.coli 飽和菌液,12,000 rpm 離心 1 分鐘,棄上清,得到細菌沉淀。
2.加入 1 mL 本產品溫和混勻后 10,000-12,000 rpm 離心 1 分鐘,棄上清(含內毒素)。
3.再重復上述操作 3-4 次,得到的菌體可以直接進入后續的無內毒素質粒 DNA 提取或無內毒素蛋白質提取程序。
二:用于菌液多于 3 mL 的樣品
整個操作同上,只是在 15 或 50 mL 塑料離心管中進行,離心速度不能超過離心管的
承受力,本產品的用量按比例增加。
背景資料內毒素的分子結構
外毒素 vs.內毒素
區別要點外毒素(Exotoxin)內毒素(Endotoxin)
存在部位由活的細菌釋放至細菌體
外,為細菌的代謝產物為細菌細胞外壁結構成
份,細胞破裂后釋出
細菌種類以革蘭氏陽性菌多見革蘭氏陰性菌多見
化學特性蛋白質(分子量 27~900 KDa),易被分解破壞,熱不穩定(60℃以上能迅速
破壞)磷脂一多糖一蛋白質復合物(毒性主要為類脂A),不易被分解破壞,
耐熱(60℃耐受數小時)
毒性作用強,微量對實驗動物有致死作用(以 ug 計量)。各種外毒素有選擇作用,引起特殊病變,不引起宿主發熱反應。抑制蛋白質合成,有細胞毒性、神經毒性、紊亂水
鹽代謝等稍弱,對實驗動物致死作用的量比外毒素為大。各種細菌內素的毒性作用大致相同。引起發熱、彌漫性血管內凝血、粒細胞減少血癥、
施瓦茲曼現象等
抗原性強,可刺激機體產生高效價的抗毒素。經甲醛處理可脫毒成為類毒霉,仍有較強的抗原性,可用于人工自動免
疫弱,刺激機體對多糖成份產生抗體,不形成抗毒素,不能經甲醛處理成為類毒素而使毒性消
失
其他幾乎無發熱性,對腫瘤細胞
無影響很強的發熱性,破壞腫
瘤細胞
例子白喉毒素,肉毒毒素,破傷風毒素厭氧菌毒素,溶血性
鏈球菌毒素等大腸桿菌,霍亂綠膿菌, 沙門氏菌,赤痢菌等。
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