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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

石蠟包埋組織切片是很重要的臨床材料，常用于研究正常細(xì)胞和疾病相關(guān)的細(xì)胞，特別是研究癌細(xì)胞中標(biāo)記蛋白的差異表達(dá)水平，后者對(duì)于診斷癌化進(jìn)展、癌癥類型的判定、癌癥的治療均有重要的意義。同時(shí)，醫(yī)院一般有大量的臨床樣品的石蠟包埋組織切片，它們是寶貴的、現(xiàn)成的樣本庫(kù)。從中提取出蛋白和核酸，并跟臨床數(shù)據(jù)對(duì)比，可以提供極其重要的病理相關(guān)信息。本試劑盒就是專門(mén)用于從石蠟包埋組織切片中快速提取總蛋白質(zhì)的試劑。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.即開(kāi)即用，簡(jiǎn)單快捷。

2.可以適用于甲醛固定的組織切片，也可用于冰凍切片，產(chǎn)量范圍在1-4 mg/mL（取決于不同種類切片的材料）。

3.不需要使用有毒的二甲苯脫蠟。

4.不需要超速離心，可以同時(shí)處理多個(gè)標(biāo)本。

5.所得蛋白提取液可以用于Western Blot、SDS-PAGE、ELISA、2D電泳、蛋白質(zhì)芯片分析或LC-MS（液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用）等。

6.本試劑盒可以使用50次，每次可以處理5張10 μM厚的石蠟包埋切片。

7.本試劑盒重復(fù)性好。

8.石蠟包埋切片蛋白提取試劑盒只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成分規(guī)格包裝材料

石蠟去除劑溶液 A100 mL125 mL 本色瓶

石蠟去除劑溶液 B7.5 mL10 mL 本色瓶

FFPE 切片蛋白抽提液7.5 mL10 mL 本色瓶

DTT 干粉30 mg0.5 mL 本色管

PMSF 溶液（0.2M）100 μL0.5 mL 藍(lán)色蓋

微型研磨杵50 只塑料袋

使用手冊(cè)1 份1 份

運(yùn)輸及保存

常溫下運(yùn)輸和保存，但 DTT 和 PMSF 溶液需要 4℃保存，石蠟去除劑溶液 A 和溶液液 B容易揮發(fā)，請(qǐng)?jiān)谑褂煤笊w緊。

自備試劑

超純水，無(wú)水乙醇、95%乙醇、70%乙醇。

使用方法：

第一次使用時(shí)，請(qǐng)將DTT干粉和PMSF溶液全部加入到FFPE切片蛋白抽提液中，輕柔顛倒混勻后再使用，未用完的需要-20℃保存。

1.取5張10 μM厚的石蠟包埋組織切片轉(zhuǎn)移到2 mL的干凈離心管中。

2.加入 2 mL 石蠟去除劑溶液A，以最大速度在渦旋振蕩儀上振蕩 10 秒。

3.加入 150 μL 石蠟去除劑溶液B，在渦旋振蕩儀上振蕩 10 秒（步驟 2.3 所用試劑為天凈沙試劑盒 230326 提供）。

4.室溫 7,000×g 離心 2 分鐘，溶液將形成兩個(gè)相，其中 FFPE 組織切片位于下相，小心吸棄上層液體（含石蠟）。

5.在下層中（含切片）加入自備的無(wú)水乙醇1 mL，靜置1分鐘，12,000×g離心2分鐘， 吸去液體，保留切片沉淀。

6.加入自備的95%乙醇1 mL，靜置1分鐘，12,000×g離心2分鐘，吸去液體，保留切片沉淀。

7.加入自備70%乙醇1 mL，靜置1分鐘，12,000×g離心2分鐘，吸去液體，保留切片沉淀。

8.打開(kāi)蓋子，空氣中晾干2分鐘。

9.用本試劑盒提供的微型研磨杵研磨3分鐘。

10.在管中加入150 μL FFPE切片蛋白抽提液，可以用抽提液洗滌下研磨杵上的殘留的樣品，蓋上蓋子，渦旋震蕩數(shù)秒。

11.將管置于冰上5分鐘后，渦旋數(shù)秒震蕩混勻。

12.用超聲處理3分鐘。如果沒(méi)有超聲儀，此步可跳過(guò)。

13.在金屬浴或水浴鍋中98℃加熱20分鐘，高速渦旋震蕩30秒。

14.在金屬浴或水浴鍋中80℃加熱2小時(shí)，期間大約每20分鐘取出，高速渦旋震蕩一次。

15.常溫14,000×g離心10分鐘，小心將上清轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的1.5 mL的干凈離心管中。所得上清為總蛋白溶液，可立即用于 SDS-PAGE、Western blot 等后續(xù)實(shí)驗(yàn)，如果暫時(shí)不用則放置在-80℃保存。

選擇我們的石蠟包埋切片蛋白提取試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！