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產(chǎn)品簡介：

本產(chǎn)品是核酸除蛋白試劑盒，pH 偏堿性，用于DNA 提取時去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。本產(chǎn)品不能用于 RNA 提取。DNA 純化時苯-酚的作用是使裂解液中的蛋白質(zhì)變性，同時抑制DNase 對 DNA 的降解作用。用苯-酚處理裂解液時，由于蛋白分子表面的很多極性基團與苯-酚相似相溶，故蛋白分子溶于酚相，而 DNA 溶于水相，從而將 DNA 和蛋白質(zhì)分開。由于苯-酚與水有一定比例的互溶，所以如果使用非飽和酚，樣品中的水分（含 DNA）會進入酚相，樣品會丟失。同時水相中也會有少量的酚，這些殘留的酚會抑制后續(xù)酶反應。而飽和酚就沒有丟失樣品的缺點，因為它已經(jīng)提前充分吸足了水分（飽和酚中含 10%左右的水分），因此不會丟失樣品。但由于仍然會有少數(shù)酚進入水相，抑制后續(xù)反應。氯仿的作用是讓水和酚徹-底分開，不互溶，徹-底去除水相中的殘留苯-酚，從水溶液中沉淀得到的 DNA 就沒有酚污染。異戊醇的作用是降低表面張力，從而減少操作過程（常常有震蕩步驟）中氣泡的產(chǎn)生，而這些氣泡的表面張力可能會使 DNA 斷裂。另外，異戊醇還有助于水相和酚相分相，使離心后的上層水相（含 DNA）、中間的變性蛋白相及下層有機溶劑相維持穩(wěn)定，便于移取上清。

產(chǎn)品參數(shù)：

成分規(guī)格包裝

核酸除蛋白溶液50 mL50 mL 棕玻瓶

微量核酸沉淀劑100 mL100 mL 本色瓶

使用手冊1 份無

運輸及保存

核酸除蛋白試劑盒(沉淀法)常溫運輸和保存，有效期 12 個月。

自備試劑

75%乙醇和超純水。

使用方法：

1.將 0.5 mL 含核酸（DNA 和 RNA）的細胞裂解液，或含有核酸的酶反應液轉移到 1.5 mL 塑料離心管中。

2.加入 0.5 mL 核酸除蛋白溶液。

3.渦旋震蕩 2 分鐘。

4.常溫 13000 g 離心 5 分鐘，溶液將呈兩層相。將含有核酸的上層無色水相轉移到一個新的離心管中。

5.在上清中加入 2 倍體積（1 mL）的微量核酸沉淀劑（用前需要搖晃混勻），顛倒 10

次充分混勻。

6.常溫 13000 g 離心 15 分鐘。

7.小心棄上清，不要觸及管底離心面的沉淀。

8.加入 1 mL 自備的 75%乙醇，顛倒 10 次。

9.常溫 13000 g 離心 3 分鐘。

10.小心棄上清后短暫離心 30 秒，去掉殘留的液體（約 50 ?L）。

11.室溫敞開蓋子兩分鐘。

12.加入自備超純水或 TE 溶液溶解 DNA，然后進行濃度測定、電泳，PCR 等后續(xù)檢測。

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