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植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑

小朋友在長(zhǎng)身體的時(shí)候，在合理飲食之外需要補(bǔ)充一些營(yíng)養(yǎng)劑，植物也一樣，需要生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，才能結(jié)出色香味俱全的果實(shí)。以蕓苔素內(nèi)酯為例，作為第六代植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，其通過(guò)適宜濃度浸種和莖葉噴施處理，可以促進(jìn)蔬菜、瓜類(lèi)、水果等作物生長(zhǎng)，可改善作物品質(zhì)，提高作物產(chǎn)量，使作物色澤艷麗、葉片更厚實(shí)，也能使茶葉的采葉時(shí)間提前、瓜果含糖份更高、個(gè)體更大、產(chǎn)量更高、更耐儲(chǔ)藏。

雖然近期的科學(xué)研究已證明，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑主要只對(duì)植物有用，對(duì)動(dòng)物或人體的副作用遠(yuǎn)低于其他農(nóng)藥，但依然需要對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格控制并合理應(yīng)用，以防止過(guò)量施用造成嚴(yán)重殘留，對(duì)農(nóng)作物未來(lái)的生產(chǎn)計(jì)劃帶來(lái)影響。2023年9月21日，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部辦公廳發(fā)布了關(guān)于切實(shí)加強(qiáng)當(dāng)前農(nóng)藥監(jiān)督管理工作的通知，強(qiáng)化農(nóng)藥安全風(fēng)險(xiǎn)防范。2024年7月26日藥典委公示了植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑殘留量的測(cè)定方法標(biāo)準(zhǔn)草案，采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用對(duì)59種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行檢測(cè)和控制，相關(guān)細(xì)節(jié)可以參考賽默飛近期發(fā)布的應(yīng)用方案。

而對(duì)于純度和濃度更高的原料控制，則可選擇更加簡(jiǎn)便易行的檢測(cè)方法。目前合成的廣泛應(yīng)用的蕓苔素內(nèi)酯主要有4種，分別是24-表蕓苔素內(nèi)酯、22,23,24-表蕓苔素內(nèi)酯、28-表高蕓苔素內(nèi)酯和28-表蕓苔素內(nèi)酯，其中24-表蕓苔素內(nèi)酯目前最為常用，由于該類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)中沒(méi)有明顯的紫外發(fā)色團(tuán)，所以采用紫外檢測(cè)器檢測(cè)困難，目前檢測(cè)方法有苯硼酸衍生后用液相色譜測(cè)定和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定其含量。行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法HG/T 4922-2016采用苯硼酸衍生后，以紫外檢測(cè)器在222nm波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定，該方法干擾峰較多，而且前處理復(fù)雜耗時(shí)。

圖1 蕓苔素內(nèi)酯類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)

本文采用Acclaim polar advantage Ⅱ色譜柱，結(jié)合電霧式檢測(cè)器（CAD）測(cè)定農(nóng)藥中24-表蕓苔素內(nèi)酯含量，該方法不需要衍生，靈敏度高，通用性強(qiáng)，非常適用于該類(lèi)物質(zhì)的檢測(cè)。

儀器配置

Thermo Fisher Vanquish高效液相色譜儀，基座:Vanquish System Base，泵：Vanquish Core Quaternary Pump（VC-P21-A），自動(dòng)進(jìn)樣器：Split Sampler CT（VC-A13-A），柱溫箱：Vanquish Column Compartment C（VC-C10-A），檢測(cè)器：Charged Aerosol Detector H（VH-D20-A），色譜軟件：變色龍Chromeleon 7.3。

圖2  配置CAD檢測(cè)器的Vanquish液相色譜儀

測(cè)定方法

色譜條件

色譜柱：Acclaim PolarAdvantage Ⅱ (150 mm×4.6 mm，5μm，P/N 063197)，流動(dòng)相：水 : 乙腈 = 60：40。流速1.0mL/min，進(jìn)樣體積15 µL，柱溫25 °C（still air）；檢測(cè)器采集頻率10Hz，過(guò)濾常數(shù)5s，蒸發(fā)溫度35℃。

對(duì)照品和供試品溶液測(cè)定譜圖

對(duì)照品溶液和供試品溶液分別進(jìn)樣分析，液相色譜測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖3-4。

圖3 對(duì)照品溶液測(cè)定譜圖

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圖4 供試品溶液測(cè)定譜圖

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測(cè)定結(jié)果

方法線(xiàn)性、精密度和準(zhǔn)確度結(jié)果

配制不同濃度的工作曲線(xiàn)對(duì)照品溶液，注入高效液相色譜儀進(jìn)行分析，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，考察方法的線(xiàn)性。結(jié)果顯示，在5.76到92.16µg/mL濃度范圍內(nèi)一次線(xiàn)性良好，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)Y=0.0565x + 0.1234，相關(guān)系數(shù)R = 0.999。

蕓苔素內(nèi)酯可溶液劑含量測(cè)定結(jié)果

實(shí)驗(yàn)所用樣品為24-表蕓苔素內(nèi)酯可溶液劑（標(biāo)示含24-表蕓苔素內(nèi)酯0.01%），取該樣品11g置25mL量瓶中，甲醇溶解并定容至刻度，后經(jīng)0.22μm PTFE濾膜過(guò)濾，作為供試品溶液上機(jī)測(cè)定。并與苯硼酸衍生方法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，結(jié)果基本一致，偏差小于2.0%。

表1 樣品測(cè)定結(jié)果

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總  結(jié)

蕓苔素內(nèi)酯類(lèi)化合物24-表蕓苔素內(nèi)酯、22,23,24-表蕓苔素內(nèi)酯、28-表高蕓苔素內(nèi)酯和28-表蕓苔素內(nèi)酯，均可采用本方法進(jìn)行測(cè)定。CAD作為通用性檢測(cè)器適合于該類(lèi)需要衍生后測(cè)定的化合物，并且簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高，對(duì)農(nóng)藥和農(nóng)產(chǎn)品中蕓苔素類(lèi)化合物的分析有較強(qiáng)參考意義。

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