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OrigamiB(DE3)感受態細胞

來源:上海淳麥生物科技有限公司   2019年10月03日 10:41  

 

OrigamiB(DE3)感受態細胞


OrigamiB(DE3) Chemically Competent Cell

產品編碼:                        保存條件: -80℃   
產品規格:

OrigamiB(DE3)20×100μl
pUC19control vector10pg/μl         10μl

 

OrigamiB(DE3)感受態細胞基因型:

F-omphsdSB(rB-mB-gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR)

 

OrigamiB(DE3)感受態細胞簡要說明:

 OrigamiB(DE3)感受態細胞包含突變的硫氧還蛋白還原酶(thioredoxin reductase(trxB) 和谷胱甘肽還原酶(glutathione reductase)(gor)基因,表達主要還原途徑的兩個關鍵酶。有利于形成正確折疊的含有二硫鍵的蛋白,增強蛋白的可溶性。 
該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(DE3區含有T7噬菌體RNA聚合酶),可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEXpMAL等質粒的蛋白表達,具有卡那霉素和四環素抗性,不能用于具有卡那霉素抗性質粒的表達。
OrigamiB (DE3) 感受態細胞由特殊工藝制作,經pUC19質粒檢測轉化效率達108cfu/μg
 
 

OrigamiB(DE3)感受態細胞操作說明:

  1.  100μl冰上融化的OrigamiB(DE3)感受態細胞,加入目的質粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

  1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基(2YTLB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YTLB培養基上。

  1.  將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。

 

OrigamiB(DE3)感受態細胞注意事項:

  1.   感受態細胞在冰上融化。
  2.  混入質粒時應輕柔操作。
  3.  轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。
  4.  誘導時,IPTG濃度可選(0.1-2mM均可)。
  5.  為獲得需要量的蛋白,誘導時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優化。

6. 具有卡那霉素抗性,不能用于具有卡那霉素抗性質粒的表達。

 

上海淳麥生物科技有限公司  感受態細胞培養專家  4006815880

OrigamiB(DE3)感受態細胞


OrigamiB(DE3) Chemically Competent Cell

產品編碼:                        保存條件: -80℃   
產品規格:

OrigamiB(DE3)20×100μl
pUC19control vector10pg/μl         10μl

 

OrigamiB(DE3)感受態細胞基因型:

F-omphsdSB(rB-mB-gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR)

 

OrigamiB(DE3)感受態細胞簡要說明:

 OrigamiB(DE3)感受態細胞包含突變的硫氧還蛋白還原酶(thioredoxin reductase(trxB) 和谷胱甘肽還原酶(glutathione reductase)(gor)基因,表達主要還原途徑的兩個關鍵酶。有利于形成正確折疊的含有二硫鍵的蛋白,增強蛋白的可溶性。 
該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(DE3區含有T7噬菌體RNA聚合酶),可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEXpMAL等質粒的蛋白表達,具有卡那霉素和四環素抗性,不能用于具有卡那霉素抗性質粒的表達。
OrigamiB (DE3) 感受態細胞由特殊工藝制作,經pUC19質粒檢測轉化效率達108cfu/μg
 
 

OrigamiB(DE3)感受態細胞操作說明:

  1.  100μl冰上融化的OrigamiB(DE3)感受態細胞,加入目的質粒并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。

  1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基(2YTLB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YTLB培養基上。

  1.  將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。

 

OrigamiB(DE3)感受態細胞注意事項:

  1.   感受態細胞在冰上融化。
  2.  混入質粒時應輕柔操作。
  3.  轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。
  4.  誘導時,IPTG濃度可選(0.1-2mM均可)。
  5.  為獲得需要量的蛋白,誘導時間,溫度,IPTG濃度需實驗者優化。

6. 具有卡那霉素抗性,不能用于具有卡那霉素抗性質粒的表達。

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