一、二級生物安全柜如何操作？
1、操作前應將本次操作所需的全部物品移入安全柜，避免雙臂頻繁穿過氣幕破壞氣流；并且在移入前用70%酒精擦拭表面消毒，以去除污染。 
2、打開風機5～10分鐘，待柜內空氣凈化并氣流穩定后再進行實驗操作。將雙臂緩緩伸入安全柜內，至少靜止1分鐘，使柜內氣流穩定后再進行操作。 
3、安全柜內不放與本次實驗無關的物品。柜內物品擺放應做到清潔區、半污染區與污染區基本分開，操作過程中物品取用方便，且三區之間無交叉。物品應盡量靠后放置，但不得擋住氣道口，以免干擾氣流正常流動。 
4、操作時應按照從清潔區到污染區進行，以避免交叉污染。為防可能濺出的液滴，可在臺面上鋪一用消毒劑浸泡過的毛巾或紗布，但不能覆蓋住安全柜格柵。
5、柜內操作期間，嚴禁使用酒精燈等明火，以避免產生的熱量產生氣流，干擾柜內氣流穩定；且明火可能損壞HEPA濾器。
6、工作時盡量減少背后人員走動以及快速開關房門，以防止安全柜內氣流不穩定。 
7、在實驗操作時，不可打開玻璃視窗，應保證操作者臉部在工作窗口之上。在柜內操作時動作應輕柔、舒緩，防止影響柜內氣流。
8、工作完成后，關閉玻璃窗，保持風機繼續運轉10～15分鐘，同時打開紫外燈，照射30分鐘。 
9、柜內使用的物品應在消毒后再取出，以防止將病原微生物帶出而污染環境。

二、二級生物安全柜注意事項
1、做好相應個人防護。在使用生物安全柜時應穿著個體防護服。
2、安全柜內物品擺放注意原則。
3、注意紫外燈的使用。生物安全柜中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話，應該每周進行清潔，以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。
4、避免使用明火。在生物安全柜內所形成的幾乎沒有微生物的環境中，應避免使用明火。
5、操作宜緩慢。實驗室中要張貼如何處理溢出物的實驗室操作規則，每一位使用實驗室的成員都要閱讀并理解這些規程。
6、柜內移動物品時應盡量避免交叉污染。
7、避免震動。生物安全柜在移動以及更換過濾器之前，必須清除污染。
8、操作結束后選用合適的消毒劑清潔安全柜內表面。由于剩余的培養基可能會使微生物生長繁殖，因此在實驗結束時，包括儀器設備在內的生物安全柜里的所有物品都應清除表面污染，并移出安全柜。
9、安全柜只有在工作正常時才能使用
10、認證。在安裝時以及每隔一定時間以后，應由有資質的專業人員按照生產商的說明對每一臺生物安全柜的運行性能以及完整性進行認證，以檢查其是否符合國家及的性能標準。
11、警報器。可以在兩種警報器中選擇一種來裝備生物安全柜。

三、二級生物安全柜日常保養
1、每次實驗結束后應對工作室進行清洗和消毒
2、過濾器一旦受損，應及時更換
3、空氣過濾器有一定的使用壽命，隨著使用期的延長，細菌和塵埃積聚在過濾器上，會導致空氣過濾器壓力損失的增大。空氣過濾器的使用壽命到期后，應立即更換。由于過濾器可能帶有污染物，操作時應注意安全防護，建議請專業人員來更換。
4、有如下情況時，應對生物安全柜進行現場檢測：
生物安全實驗室竣工后及使用前，生物安全柜安裝完畢
生物安全柜移動位置
對生物安全柜進行檢修
生物安全柜更換HEPA過濾器后
一年一度常規檢測