IMDM培養基在DMEM培養基的基礎上添加了硒、HEPES、丙酮酸鈉以及額外的氨基酸和維生素,并用硝酸鉀代替了硝酸鐵,營養非常豐富,非常適合于快速增殖,高密度細胞培養。IMDM培養基不僅可以培養有特殊營養要求的細胞,還可以作為一些特別的無血清培養基的基礎液。IMDM培養基的使用方法:
1、準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
2、校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1NHCl調節pH值到適宜范圍內。
3、過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用IMDM(含雙抗)紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。
4、分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
5、滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*底滅菌的目的。
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