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STR鑒定有哪些操作流程和注意事項

來源:鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司   2024年03月04日 11:35  
  STR鑒定的操作流程主要包括細胞提取、PCR擴增、電泳分離、數(shù)據(jù)分析和結(jié)果比對。
  細胞提取:從待驗證的細胞樣本中提取DNA。這通常通過使用特定的提取方法,如酚/氯仿法或商業(yè)化的DNA提取試劑盒來完成。
  PCR擴增:提取的DNA進行PCR(聚合酶鏈式反應)擴增,以增加待測STR位點的數(shù)量,從而提高檢測敏感性。在PCR反應中,使用具有特異性的引物來擴增選擇的STR位點。
  電泳分離:PCR反應產(chǎn)物與分析媒介(如聚丙烯酰胺凝膠)混合后,通過電泳技術進行分離。電泳時,DNA片段按照大小被分離成不同的條帶,從而形成電泳圖譜。
  數(shù)據(jù)分析:將電泳分離得到的STR位點圖譜進行檢測和解讀。這通常通過使用自動DNA分析設備,通過軟件分析電泳圖譜,測定每個STR位點處相應的等位基因數(shù)量來完成。
  結(jié)果比對:將待驗證細胞的STR位點與已知樣本(如參考樣本或數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù))進行比對分析。通過比對,確定待驗證細胞樣本與參考樣本的相似性,以得出驗證結(jié)果。
  注意事項包括:
  在進行STR測定時,要遵循操作規(guī)范,確保實驗結(jié)果的準確性。
  選擇合適的樣品進行測定,確保樣品具有代表性。
  在使用STR測定儀器之前,進行儀器的校準,以保證測量結(jié)果的準確性。
  及時記錄實驗數(shù)據(jù),避免遺漏或錯誤。
  保持實驗環(huán)境的穩(wěn)定,避免外部因素對實驗結(jié)果的影響。
  此外,還需要注意樣品寄送的方式和時間,以及結(jié)果的交付方式。樣品應通過加干冰或冰袋的方式寄送,并保證細胞數(shù)量足夠。常規(guī)檢測時間通常為2~3周,超常檢測時間則在10個工作日之內(nèi)。
  總的來說,STR鑒定是一項復雜且需要高度專業(yè)性的技術,建議在專業(yè)實驗室或?qū)I(yè)人員的指導下進行。

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