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萬柏隔水式細胞復蘇儀是通過快速融化的手段保證細胞外結冰晶在很短時間內(nèi)融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞重新結晶對細胞造成損害，復蘇成功的細胞可以保持很高的活力。
當溫度進一步下降，細胞內(nèi)外都結冰，產(chǎn)生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護劑，則可保護細胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。因為冷凍保護劑容易同溶液中的水分子結合，從而降低冰點，減少冰晶的形成，并且通過其摩爾濃度降低未結冰溶液中電解質(zhì)的濃度，使細胞免受溶質(zhì)損傷，細胞得以在超低溫條件下保存。
在復蘇時，一般以很快的速度升溫，1-2 分鐘內(nèi)即恢復到常溫，細胞內(nèi)外不會重新形成較大的冰晶，也不會暴露在高濃度的電解質(zhì)溶液中過長的時間，從而無冰晶損傷和溶質(zhì)損傷產(chǎn)生，凍存的細胞經(jīng)復蘇后仍保持其正常的結構和功能。
冷凍保護劑對細胞的冷凍保護效果還與冷凍速率、冷凍溫度和復溫速率有關。而且不同的冷凍保護劑其冷凍保護效果也不一樣。
冷凍保護體外培養(yǎng)物，除了必須有最佳的冷凍速率、合適的冷凍保護劑和凍存溫度外，在復蘇時也必須有最佳的復溫速率，這樣才能保證最后獲得最佳冷凍保存效果。復溫速率是指在細胞復蘇時溫度升高的速度。復溫速率不當也會降低凍存細胞存活率。一般來說，復溫速度越快越好。常規(guī)的做法是，在 370C 水浴中，于1-2分鐘內(nèi)完成復蘇。復溫速度過慢，細胞內(nèi)往往重新形成較大冰晶而造成細胞損傷。復溫時造成的細胞損傷非常快，往往在極短的時間內(nèi)發(fā)生。
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