茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵微板法)
產品貨號:BA1570
產品規格:100T
產品簡介:
茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶葉中多酚類物質的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,是一類兒茶素為主體的黃酮化合物,兒茶素占60~80%,具有C6-C3-C6碳骨架結構,是一種重要的天然抗氧化物質,能夠清除自由基。類物質茶多酚又稱茶鞣或茶單寧,是形成茶葉色香味的主要成份之一,也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物質具解毒和抗輻射作用,能有效地阻止放射性物質侵入骨髓,并可使鍶90和鈷60迅速排出體外。
茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵微板法)檢測原理是以酒石酸鐵為底物,利用茶多酚與酒石酸鐵反應,生成穩定紫藍色化合物,以酶標儀540nm處測定吸光度,在一定范圍內吸光度與顏色深淺的變化成正比,與標準曲線比較進而計算茶多酚含量,該試劑盒主要用于測定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量,尤其適用于測定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產品組成:
產品名稱 | 100T | 保存條件 |
試劑(A): 茶多酚標準(1mg/ml) | 1ml | 2-8℃,避光 |
試劑(B): TP Assay buffer | 15ml | 2-8℃ |
試劑(C): TP顯色液 | 5ml | 2-8℃,避光 |
自備材料:
1. 茶葉、綠茶等待測樣本
2. 蒸餾水
3. 研缽、200目細胞篩
4. 離心管或試管
5. 水浴鍋或電爐
6. 離心機
7. 96孔板、酶標儀
操作步驟(僅供參考):
1. 準備樣品:
①植物樣品:取0.2g植物組織,研磨成粉末,加入煮沸的蒸餾水10ml,沸水浴浸提20min,用200目細胞篩過濾,濾渣再繼續置于新的煮沸的10ml蒸餾水,相同操作提取一次,合并兩次濾液,5000r/min離心15min,取上清液,即為茶多酚提取液。4℃避光保存,用于茶多酚的檢測。綠茶等液體樣本可直接用本試劑盒測定。
②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備后可直接用本試劑盒測定。
③細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,如有必要可用蒸餾水進行適當勻漿,5000r/min離心15min,取上清液,即為茶多酚提取液,4℃避光保存。
④高濃度樣品:如果樣品中含有較濃度的茶多酚,可以使用蒸餾水進行適當稀釋。
2. 配制系列茶多酚標準:用蒸餾水和茶多酚標準(1mg/ml),按下表進行操作,依次稀釋。
加入物(μl) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
茶多酚標準(1mg/ml) | 2 | 5 | 10 | 30 | 50 | 80 |
蒸餾水 | 98 | 95 | 90 | 70 | 50 | 20 |
相當于茶多酚含量(μg/ml) | 20 | 50 | 100 | 300 | 500 | 800 |
3. TP加樣:取96孔板,按照下表設置空白孔、對照孔、測定孔,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡。如果樣品中的TP濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行孔,求平均值。
加入物(μl) | 空白孔 | 標準孔 | 測定孔 |
蒸餾水 | 50 | 25 | 25 |
系列茶多酚標準(1~6號) | - | 25 | - |
待測樣品 | - | - | 25 |
TP 顯色液 | 50 | 50 | 50 |
TP Assay buffer | 150 | 150 | 150 |
4. TP測定:以空白調零,酶標儀測定540nm處標準孔、測定孔的吸光度。
計算:
以系列茶多酚標準濃度(1~6號)(20、50、100、300、500、800μg/ml)為橫坐標,以對應的吸光度為縱坐標,繪制標準曲線,求得回歸方程。以測定管吸光度代入回歸方程求得提取液中TP含量。
組織樣本TP含量(μg/g)= (C×V T )/(W×V S )
式中:C=根據標準曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)
VT =提取液的總體積(ml)
W=組織樣本的重量(g)
VS =測定時所用提取液的體積(ml)
液體樣本TP含量(μg/ml)= (C×VT )/ VS
式中:C=根據標準曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)
VT=提取液的總體積(ml)
VS=測定時所用提取液的體積(ml)
注意事項:
1. 提取茶多酚時,注意提前煮沸蒸餾水,以便充分提取。提取液宜4℃避光保存。
2. 提取時間過長,茶多酚會發生氧化反應,導致測定結果不準確,建議2h內測定完成。
3. 如果沒有分光光度計,也可以使用普通的酶標儀測定,但應注意酶標儀最大檢測體積。
4. 每次檢測指標不宜過多,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異。
5. TP顯色液容易失效,建議4℃避光保存。
6. 采用分光光度計未調零情況下,空白參考值為0.102,100μg/ml參考值為0.265,一般情況下濃度在200~600μg/ml 時測定結果更準確。由于儀器設備、操作方法等不同,參考值會有差異。
7. 該試劑盒測定范圍為10~1200μg/ml;以肉眼觀察,濃度小于100μg/ml 幾乎呈無色,濃度大于100μg/ml即可顯淡紫藍色,300μg/ml呈明顯的紫藍色。
有效期:3個月有效。4℃運輸,4℃保存。
茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵微板法)
產品貨號:BA1570
產品規格:100T
產品簡介:
茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶葉中多酚類物質的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,是一類兒茶素為主體的黃酮化合物,兒茶素占60~80%,具有C6-C3-C6碳骨架結構,是一種重要的天然抗氧化物質,能夠清除自由基。類物質茶多酚又稱茶鞣或茶單寧,是形成茶葉色香味的主要成份之一,也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物質具解毒和抗輻射作用,能有效地阻止放射性物質侵入骨髓,并可使鍶90和鈷60迅速排出體外。
茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵微板法)檢測原理是以酒石酸鐵為底物,利用茶多酚與酒石酸鐵反應,生成穩定紫藍色化合物,以酶標儀540nm處測定吸光度,在一定范圍內吸光度與顏色深淺的變化成正比,與標準曲線比較進而計算茶多酚含量,該試劑盒主要用于測定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量,尤其適用于測定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產品組成:
產品名稱 | 100T | 保存條件 |
試劑(A): 茶多酚標準(1mg/ml) | 1ml | 2-8℃,避光 |
試劑(B): TP Assay buffer | 15ml | 2-8℃ |
試劑(C): TP顯色液 | 5ml | 2-8℃,避光 |
自備材料:
1. 茶葉、綠茶等待測樣本
2. 蒸餾水
3. 研缽、200目細胞篩
4. 離心管或試管
5. 水浴鍋或電爐
6. 離心機
7. 96孔板、酶標儀
操作步驟(僅供參考):
1. 準備樣品:
①植物樣品:取0.2g植物組織,研磨成粉末,加入煮沸的蒸餾水10ml,沸水浴浸提20min,用200目細胞篩過濾,濾渣再繼續置于新的煮沸的10ml蒸餾水,相同操作提取一次,合并兩次濾液,5000r/min離心15min,取上清液,即為茶多酚提取液。4℃避光保存,用于茶多酚的檢測。綠茶等液體樣本可直接用本試劑盒測定。
②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備后可直接用本試劑盒測定。
③細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,如有必要可用蒸餾水進行適當勻漿,5000r/min離心15min,取上清液,即為茶多酚提取液,4℃避光保存。
④高濃度樣品:如果樣品中含有較濃度的茶多酚,可以使用蒸餾水進行適當稀釋。
2. 配制系列茶多酚標準:用蒸餾水和茶多酚標準(1mg/ml),按下表進行操作,依次稀釋。
加入物(μl) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
茶多酚標準(1mg/ml) | 2 | 5 | 10 | 30 | 50 | 80 |
蒸餾水 | 98 | 95 | 90 | 70 | 50 | 20 |
相當于茶多酚含量(μg/ml) | 20 | 50 | 100 | 300 | 500 | 800 |
3. TP加樣:取96孔板,按照下表設置空白孔、對照孔、測定孔,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡。如果樣品中的TP濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行孔,求平均值。
加入物(μl) | 空白孔 | 標準孔 | 測定孔 |
蒸餾水 | 50 | 25 | 25 |
系列茶多酚標準(1~6號) | - | 25 | - |
待測樣品 | - | - | 25 |
TP 顯色液 | 50 | 50 | 50 |
TP Assay buffer | 150 | 150 | 150 |
4. TP測定:以空白調零,酶標儀測定540nm處標準孔、測定孔的吸光度。
計算:
以系列茶多酚標準濃度(1~6號)(20、50、100、300、500、800μg/ml)為橫坐標,以對應的吸光度為縱坐標,繪制標準曲線,求得回歸方程。以測定管吸光度代入回歸方程求得提取液中TP含量。
組織樣本TP含量(μg/g)= (C×V T )/(W×V S )
式中:C=根據標準曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)
VT =提取液的總體積(ml)
W=組織樣本的重量(g)
VS =測定時所用提取液的體積(ml)
液體樣本TP含量(μg/ml)= (C×VT )/ VS
式中:C=根據標準曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)
VT=提取液的總體積(ml)
VS=測定時所用提取液的體積(ml)
注意事項:
1. 提取茶多酚時,注意提前煮沸蒸餾水,以便充分提取。提取液宜4℃避光保存。
2. 提取時間過長,茶多酚會發生氧化反應,導致測定結果不準確,建議2h內測定完成。
3. 如果沒有分光光度計,也可以使用普通的酶標儀測定,但應注意酶標儀最大檢測體積。
4. 每次檢測指標不宜過多,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異。
5. TP顯色液容易失效,建議4℃避光保存。
6. 采用分光光度計未調零情況下,空白參考值為0.102,100μg/ml參考值為0.265,一般情況下濃度在200~600μg/ml 時測定結果更準確。由于儀器設備、操作方法等不同,參考值會有差異。
7. 該試劑盒測定范圍為10~1200μg/ml;以肉眼觀察,濃度小于100μg/ml 幾乎呈無色,濃度大于100μg/ml即可顯淡紫藍色,300μg/ml呈明顯的紫藍色。
有效期:3個月有效。4℃運輸,4℃保存。
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