E.coli HCP ELISA檢測試劑盒(2G):精準定量宿主蛋白殘留的科研利器
產品概述
E.coli HCP ELISA檢測試劑盒(2G)是一款專為科研和工業領域設計的檢測工具,用于精準定量生物制品(如疫苗、重組蛋白藥物)中間品、半成品及成品中殘留的大腸桿菌宿主細胞蛋白(HCP)。該試劑盒采用雙抗體夾心法,結合高靈敏度酶標技術,可檢測低至0.3 ng/mL的蛋白殘留,為生物制藥質量控制提供可靠支持。
核心優勢
- 高靈敏度與寬檢測范圍:檢測限0.3 ng/mL,定量限1 ng/mL,覆蓋1.5625-100 ng/mL線性范圍。
- 高精度與穩定性:精密度CV%≤10%,回收率偏差RE%≤±15%,確保實驗數據可重復。
- 廣泛適用性:兼容DH5α、BL21等常用工程菌株,適用于多種生物制品基質。
- 即用型設計:預包被酶標板、即用標準品及優化試劑配方,簡化實驗流程。
應用場景
- 生物制藥研發:監測重組蛋白、抗體藥物生產過程中E.coli宿主蛋白殘留。
- 質量控制:評估藥品中間品、成品的純度與安全性。
- 科研實驗:用于基因工程菌相關研究中的HCP定量分析。
檢測原理
采用雙抗體夾心ELISA技術:
1. 捕獲抗體包被:預包被E.coli HCP特異性抗體的酶標板捕獲樣本中的目標蛋白。
2. 酶標抗體結合:HRP標記的二抗與HCP結合,形成“抗體-抗原-酶標抗體”復合物。
3. 顯色定量:TMB底物顯色后,通過吸光度值(OD450/650nm)計算HCP濃度,結合標準曲線實現精準定量。
操作流程簡述
1. 樣本處理:用樣本稀釋液稀釋待測樣品及標準品。
2. 加樣與孵育:將標準品、樣本加入酶標板,37℃孵育1小時。
3. 洗滌與標記:洗去未結合物質,加入稀釋后的酶標抗體二次孵育。
4. 顯色與終止:TMB顯色液反應后,加入終止液終止反應。
5. 數據分析:讀取OD值,通過四參數方程擬合標準曲線,計算樣本濃度。
儲存與有效期
- 未開封試劑盒:-20℃保存,有效期12個月。
- 開封后:顯色液需2-8℃避光保存,酶標板短期存放于2-8℃。
常見問題解答(Q&A)
Q:陰性對照出現陽性信號怎么辦?
A:可能是交叉污染或洗滌不徹i底,建議更換試劑、規范操作并充分洗滌。
Q:標準曲線顯色弱或無信號?
A:檢查試劑活性、稀釋步驟是否正確,確保酶標抗體和底物未失效。
Q:復孔數據差異大如何解決?
A:優化移液操作,確保槍頭氣密性,避免樣本基質干擾。
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