一、免疫細胞無血清培養基概述

免疫細胞無血清培養基可用于臍帶血或外周血中分離到的單核細胞向CIK細胞（細胞因子誘導的殺傷細胞）的體外誘導及體外大規模擴增培養。

二、免疫細胞無血清培養基特點

1、無血清培養基，無添加細胞因子

2、無異源動物成分，化學成分限定培養基

3、培養性能，支持高密度單核細胞培養

三、免疫細胞無血清培養基應用

1、DC細胞、CIK細胞和NK細胞的長期增殖培養

2、PBL細胞和TIL細胞的長期增殖培養

3、單核細胞和巨噬細胞的長期增殖培養

4、T淋巴細胞的長期增殖培養

四、免疫細胞無血清培養基使用方法

1、采集與分離外周血采集外周血，Ficoll密度梯度離心分離收集單個核細胞。

2、單個核細胞的接種與誘導活化

1)0d時，繃胞計數。按細胞密度2x106cell/mL接種至對應體積的培養液中。添加誘導因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。

2)1d時(24小時)，添加誘導因子YC002、YC003、YC004至已經接種細胞的培養液中。將YC005添加至未經使用的培養基中，待用。

3、細胞的連續培養與擴增

1)3d時，補入新鮮培養液，調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同時添加新加入培養液體積l10%比例的自體血漿。補液比例大致在1：2左右（原有培養液體積：新加培養液體積）

2)5d時，補入新鮮培養液，調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。補液比例大致在1：3左右。

3)7d時，補入新鮮培養液，調整細胞密度至(06-08）x106cell/mL。補液比例大致在1：2左右。

4)9d時，將剩余培養液全部加入。

4、收獲細胞

培養周期結束后，依據細胞量收獲細胞。

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