一、目的要求

1、正確掌握使用及護理顯微鏡的方法，特別是油浸系的使用及護理。

2、認識細菌的基本形態和構造。

二、操作步驟

1、普通光學顯微鏡的構造

普通光學顯微鏡包括機械部分和光學部分兩部分。機械部分包括鏡座、鏡臂、鏡筒、載物臺、物鏡轉換器、粗調節螺旋、細調節螺旋、標本夾等。光學部分包括接目鏡、接物鏡、反光鏡、光圈（虹采）、聚光鏡（集光器）等。

2、油浸系的原理

浸系是在油浸鏡與標本之間加1滴香柏油，調整光源檢查細菌標本的方法。油浸鏡是一種高倍放大的物鏡，一般都刻有放大倍數，如95x、100x等。其鏡頭標記國產鏡多用“油”字表示，國外產品則用“Oil”（Oil Immersion）或HI（homogeneous Immersion）表示。而且油鏡的鏡身較高倍鏡和低倍鏡為長，鏡片最小，這也是識別的另一種標志。其使用原理是：由于香柏油與玻璃的折光率相似（香柏油為1.515，玻璃為1.52）。鏡檢時，滴加香柏油的作用是使光源盡可能多的進入物鏡中，避免光線通過折光率低的空氣（折光率為1.0）而散失，因而能提高物鏡的分辨率，使物像明亮清晰。

3、使用方法

鏡檢者需姿勢端正，一般用左眼觀察，右眼用于繪圖和記錄，兩眼同時睜開，以減少疲勞。光源用自然光線或人工光源，注意避開直射日光。用人工光源時，為了避免赤黃光線，需在集光鏡下裝入藍色濾光片。

三、顯微鏡油浸系的原理

1、對光

將光圈開放，升高聚光鏡與載物臺同高，置標本片于載物臺上，在低倍鏡下對光，用手轉動反光鏡以調節之，至視野最亮時為止。若用天然光源宜用反光鏡平面，較弱光源用凹面。檢查未染色標本，光不宜太強，染色標本需強光。光線強弱可通過放大或縮小光圈、升降聚光鏡、旋轉反光鏡調節之。

2、加油  

將標本放在載物臺上，染色部位正對集光器的，用標本夾固定好，滴加香柏油1滴，用油浸鏡檢查，使油鏡頭浸入油滴中，幾乎與標本面接觸為度，然后由接目鏡注視鏡內，同時慢慢轉動粗調節螺旋提起鏡筒（不能下降鏡筒！）至能模糊看到物像時，再轉動細螺旋（細螺旋轉動一般不超過一周），直至物像清晰為止。

四、顯微鏡的保護

1、從鏡箱內取顯微鏡時，應以右手持鏡臂以水平方向慢慢抽出，不得碰鏡，再以左手托鏡座，保持鏡體平行，以防反光鏡及接目鏡滑落。

2、顯微鏡各鏡頭不可用手指拭抹，應用擦鏡紙或用綢布輕拭之。油鏡用過后，立即用擦鏡紙拭之，若油漬已干，則需用擦鏡紙蘸二甲苯拭之，然后用干燥鏡紙輕拭之。鏡體可用軟布輕拭，以保持清潔。

3、用過后應將顯微鏡各部復位，尤其注意不要讓接物鏡對集光器，同時把集光器下降，以免發生碰撞，然后置鏡箱內鎖好。

4、注意防潮，勿靠近熱源及有腐蝕性的化學藥品。顯微鏡各零件不要任意拆卸，尤其是光學部分，以免損壞。

五、細菌正常形態的觀察

練習顯微鏡油浸系的使用，觀察已制好的細菌染色標本，如葡萄球菌、鏈球菌、四聯球菌、大腸桿菌、枯草桿菌、螺旋狀菌及細菌的莢膜、芽胞和鞭毛，并進行繪圖。

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