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HyClone血清沉淀處理與使用建議

來源:天津益元利康生物科技有限公司   2025年04月08日 17:50  

以下是針對 HyClone 胎牛血清 的沉淀處理與使用建議的詳細指南,幫助您高效解決問題并確保實驗穩(wěn)定性:

一、HyClone血清沉淀的常見類型與判斷

沉淀類型

特征

是否影響實驗

纖維蛋白絮狀物

白色絮狀或絲狀漂浮物,37°C可溶解

通常不影響,過濾后可用

磷酸鈣結(jié)晶

顯微鏡下可見細微顆粒,解凍后渾濁

可能干擾光學檢測,建議過濾

變性蛋白/脂質(zhì)

黃色渾濁或塊狀沉淀,37°C不溶解

可能影響細胞活性,建議停用


二、HyClone血清沉淀處理步驟

1. 常規(guī)處理方法(適用于正常沉淀)

 解凍與溶解:

將血清從-20°C轉(zhuǎn)移至 4°C冰箱過夜緩慢解凍(避免高溫快速解凍)。

若需快速解凍,可置于 37°C水浴,每隔5分鐘輕輕搖晃,總時間不超過30分鐘。 

混勻與靜置:

解凍后輕柔搖勻,避免劇烈震蕩(防止脂蛋白氧化)。

若有少量絮狀物,將血清在 4°C靜置1-2小時,沉淀會沉至管底。

分裝上清:

用無菌移液管小心吸取上清液,避免觸及底部沉淀。

剩余含沉淀的血清可丟棄或單獨標記備用(如非敏感實驗)。

2. 過濾處理(針對頑固或敏感實驗) 

適用場景:干細胞培養(yǎng)、病毒生產(chǎn)、熒光檢測等對純度要求高的實驗。

操作步驟:

使用 0.22μm孔徑無菌濾膜(推薦低蛋白吸附材質(zhì),如PES膜)。

在超凈臺中將血清通過濾器緩慢過濾至新無菌管中。

過濾后分裝,立即凍存。

3. 異常沉淀處理(疑似變質(zhì))

特征:沉淀無法溶解、血清變色(發(fā)紅/發(fā)黑)、渾濁或有異味。

【操作】

立即停止使用,記錄批號并拍照留存。

聯(lián)系供應(yīng)商(如Cytiva或授權(quán)經(jīng)銷商)提供質(zhì)檢報告或退換貨。

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三、HyClone血清使用建議與預防措施

1. 分裝與儲存

分裝體積:按實驗需求分裝為 10ml/管或50ml/管(減少反復凍融次數(shù))。

凍存條件:-20°C保存(避免-80°Cjiduan溫可能增加沉淀風險)。

開封后保存:

4°C短期存放不超過 1個月,使用時避免頻繁取出回溫。

長期未用完建議重新分裝凍存。

2. 解凍與混勻技巧

推薦方法:

4°C過夜解凍 室溫平衡15分鐘 輕柔旋轉(zhuǎn)混勻。

避免操作:

高溫水浴超過30分鐘(加速蛋白變性)。

劇烈震蕩或渦旋(導致脂質(zhì)氧化和泡沫生成)。

3. 沉淀預防措施

減少凍融次數(shù):每次凍融可能析出5-10%的沉淀,建議分裝后單次使用。

避免溫度波動:凍存血清盡量放置于冰箱穩(wěn)定區(qū)域(遠離冰箱門)。

 選擇低沉淀型號:

 型號(如HyClone SH30070)經(jīng)過超濾處理,沉淀更少。

 γ-照射處理型號(如SV30087)可降低生物負荷,但可能略微增加沉淀。

 四、HyClone血清不同實驗場景的優(yōu)化建議

實驗類型

推薦操作

注意事項

常規(guī)細胞培養(yǎng)

直接使用靜置后的上清液

定期顯微鏡觀察細胞狀態(tài)

干細胞/原代細胞

必須過濾(0.22μm)或選擇預過濾血清(SH30070

檢測克隆形成率和分化能力

熒光定量檢測

過濾后使用,避免顆粒干擾光信號

同步設(shè)置空白對照(含血清培養(yǎng)基)

大規(guī)模生產(chǎn)

使用工業(yè)級大包裝(如500ml/瓶),分裝前預過濾

驗證批次一致性


五、HyClone血清常見問題解答

Q1:過濾會損失血清中的生長因子嗎?

答:0.22μm過濾可能截留部分大分子復合物,但對多數(shù)生長因子(如EGFFGF)影響較小。若擔心活性損失,可選擇HyClone預過濾血清或減少過濾體積。

Q2:血清沉淀是否意味質(zhì)量問題?

答:少量沉淀(尤其是纖維蛋白)是正常現(xiàn)象,與生產(chǎn)工藝相關(guān),不代表產(chǎn)品失效。需結(jié)合細胞生長測試判斷。

Q3:如何評估新批次血清是否適用?

答:進行 細胞增殖實驗:

使用新舊批次血清平行培養(yǎng)細胞(如HEK293)。

 比較細胞貼壁率、倍增時間和形態(tài)。

 若差異顯著,聯(lián)系供應(yīng)商協(xié)商更換。

六、緊急情況處理

細胞突然死亡:立即停用血清,換用已知良好的舊批次或培養(yǎng)基基礎(chǔ)液維持,排查其他污染源(如支原體)。

批量沉淀問題:聯(lián)系HyClone技術(shù)支持(Cytiva提交工單),提供批號、儲存條件及沉淀照片。


通過以上處理與預防措施,可減少HyClone血清沉淀對實驗的影響。如需特定型號的詳細參數(shù)或替代方案,請?zhí)峁嶒灳唧w需求!

 

HyClone血清代理——天津益元利康生物科技有限公司公司產(chǎn)品線涉及細胞與基因治療、免疫學、分子生物學、細胞生物學等多個方向,專注于生命科學試劑、耗材、細胞、儀器等產(chǎn)品銷售

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