前言：

注射劑疫苗作為預防傳染病的核心手段，其無菌質量直接關乎公眾健康與全球公共衛生安全。隨著新型疫苗（如mRNA疫苗、病毒載體疫苗）的技術迭代與2025版《藥品生產質量管理規范（GMP）》無菌附錄的實施，無菌防護已從“經驗性控制”升級為“科學性防控”，對生產過程的全鏈條微生物污染控制提出了更高要求，對我們的更是一種大跨度的挑戰。

本文關鍵詞；2025GMP、注射劑疫苗、凍干疫苗、mRNA疫苗、病毒載體疫苗、微生物、微生物控制、無菌車間、潔凈區消毒、潔凈區消毒方式、微生物限度、微生物菌落控制、潔凈區殺孢子劑、潔凈區、控制區、潔凈區消毒滅菌、無菌室、醫藥、殺孢子劑、工廠潔凈室微生物控制、生物工程GMP車間、芽孢、腐蝕性、空氣物表消毒、一站式消毒滅菌解決方案、技術咨詢服務。

一、潔凈環境：從硬件標準到動態控制

（一）潔凈區分級與氣流屏障構建

1.分級標準：嚴格遵循ISO 14644與《藥品生產質量管理規范》，將核心區域劃分為：

- 核心（靜態/動態ISO 5級）：灌裝、分裝、凍干加塞等關鍵操作區，采用層流罩或隔離器系統，確保顆粒物≤3520個/m3（≥0.5μm），微生物≤1 CFU/4小時（沉降菌）；

- B級（ISO 7級）：核心區背景環境，采用湍流流型，顆粒物≤352,000/m3，微生物≤50 CFU/4h；

- C/D級：輔助區域（如稱量、洗瓶），通過壓差梯度（≥10Pa，內部標準若高，按照內部標準）防止污染逆流。

2. 氣流優化：

- 采用“垂直層流+水平層流”組合設計，核心層流罩與灌裝機形成封閉微環境，避免人員動作產生的紊流影響；

- 凍干機、滅菌柜等設備設置獨立排風系統，排氣經除菌過濾器，防止殘留蒸汽攜帶微生物擴散。

（三）建筑與設備材質無菌化

1.表面材質：

- 墻面/地面使用無縫環氧樹脂，陰陽角做圓弧處理，避免積塵。

- 設備采用316L不銹鋼（拋光至國家標準，內部標準為主，不可劣于國家標準），管道連接使用衛生級卡箍（避免螺紋接口），減少生物膜滋生風險。

2.照明與監控：

- 潔凈區照度≥300lux，采用嵌入式LED燈（國家標準要求無積塵設計）；

- 部署AI視覺監控系統，自動識別人員違規動作（如未戴手套接觸設備、劇烈走動產塵），并聯動門禁系統限制進入（核心區域存在不得同時超過4人）。

二、消毒滅菌：全場景覆蓋的技術矩陣

(一）空間與環境消毒

1.終末滅菌（周期性）：

- 汽化過氧化氫（VHP）：B級潔凈區、隔離器、傳遞窗使用奧克泰士（過氧化氫+銀離子復合配方）冷干霧化處理，濃度維持在一定區間，作用90分鐘，芽孢殺滅率≥10^-6（采用嗜熱脂肪芽孢桿菌舉例），相比傳統VHP效率提升30%，且對電子元件腐蝕性降低70%；

- 干霧滅菌：對無法耐受濕熱的設備（如伺服電機、傳感器），采用奧克泰士冷干霧霧化處理，30分鐘內殺滅表面真菌孢子（如黑曲霉）。

2.日常清潔（動態）：

- 核心區：每班次結束（主清潔后滅菌）用奧克泰士溶液擦拭設備表面（如灌裝針頭、軋蓋機），搭配無菌聚酯纖維擦拭布（國家標準要求落絮≤5個/100cm2）；

- B/C級區：每規定日期用奧克泰士霧化消毒，降低環境微生物負荷，維持環境潔凈度，減少爆發隱患。

（二）設備與物料滅菌

1.在線清洗/滅菌（CIP/SIP）：

- 生物反應器：CIP流程為80℃純化水沖洗→奧克泰士循環30分鐘→無菌水沖洗，SIP采用121℃濕熱滅菌30分鐘，驗證溫度均一性（要求偏差±1℃）；

- 除菌過濾器：使用前進行完整性測試（泡點法，壓力偏差≤5%），過濾后用奧克泰士浸泡（防止濾芯表面細菌再生，如假單胞菌清除率≥99.9%）。

2.物料處理：

- 液體原料：經0.22μm除菌級濾芯過濾（如疫苗抗原溶液），過濾前后檢測粒徑分布（激光粒度儀，變異系數≤10%）；

- 固體原料/包裝材料：西林瓶/膠塞通過隧道式滅菌柜（300℃干熱滅菌45分鐘），并在層流保護下傳輸，膠塞硅化前用奧克泰士噴霧消毒（霉菌孢子負載從50CFU/個降至<5CFU/個）。

（三）人員與物料管控

1.人員管理：

- 更衣驗證：進入核心區需經過三級更衣，每級更衣間設風速監測，穿戴后進行“塵埃測試”（粘性滾筒粘貼全身，落絮≤10/次），手套表面微生物≤ 5 CFU/雙（接觸碟法）；

- 培訓與監測：每月進行微生物攜帶檢測（手指、口罩內側采樣），重點監控金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌，超標人員強制重新培訓及更衣。

2.物料傳遞：

- 傳遞窗采用雙門互鎖+紫外線照射+奧克泰士噴霧雙重消毒，物料在外側預處理后，經層流傳遞窗進入核心區；

- 一次性耗材（如無菌手套、擦拭布）需通過生物相容性測試細胞毒性、內毒素，并在滅菌后4小時內使用（內部延長保存時間要放到專用潔凈袋）。

三、關鍵工藝：從灌裝到凍干的精準控制

（一） 灌裝工藝

1. 設備選型：采用伺服驅動灌裝泵，針頭設計為“鈍針+斜切面”（減少液滴殘留），并在針頭上方設層流保護（風速0.5m/s，內部標準為準則）；

2. 過程控制：灌裝速度與軋蓋機同步，避免瓶口暴露時間過長，每班次開始前進行“空機運行驗證”（檢測灌裝量波動≤1%，漏液率≤0.01%）。

（二）凍干工藝

1. 凍干機性能：擱板溫度均勻性≤±0.5℃，真空度維持在標準內通過DSC差示掃描量熱法測定物料共晶點，升溫速率控制在標準內，防止“噴瓶”；

2. 無菌保障：凍干結束后充入無菌氮氣，并對凍干機腔體進行奧克泰士熏蒸（適合濃度，作用60分鐘，延長或縮短應對應產品），防止開門時外界濕氣帶入導致微生物滋生。

（三）一次性技術應用

1. 優勢：采用一次性生物反應袋無菌灌裝管路，避免交叉污染，使用后整體丟棄，減少清潔驗證工作量（干預可以采取，避免隱患）；

2. 驗證要點：一次性耗材需通過E&L測試，確保析出物不影響疫苗質量（如金屬離子≤1ppm，有機污染物≤10ppm）。

四、監測與驗證：從實時監控到數據閉環

（一）環境監測系統（EMS）

1. 在線監測參數：

- 物理參數：粒子計數器（核心區實時連續監測，報警閾值3520個/m3和20個/m3）、溫濕度（20-24℃，45-60%RH）、壓差（波動超過±2Pa觸發聲光報警），報警閾值、溫濕度、壓差偏差按照內部標準，不超國家規定范圍；

- 微生物參數：浮游菌采樣器（流量100L/min，核心區每4小時一次）、沉降菌碟（直徑90mm，暴露4小時，B級區每周一次）、表面接觸碟（55cm2，設備表面每班次一次），按照內部標準實施，內部標準不低于國家標準。

2. 數據管理：

- 采用PLC系統整合所有監測數據，通過分析趨勢（如粒子數連續30分鐘上升10%自動預警），數據存儲符合標準原則（可追溯、長期保存）；

- 每月生成《潔凈區微生物趨勢分析報告》，識別污染熱點（如灌裝機轉盤區域微生物檢出率偏高，針對性增加消毒頻率）。

（二）滅菌驗證與偏差處理

1.驗證項目：

- 生物指示劑（BI）挑戰：在VHP滅菌柜、隧道烘箱中放置嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢條（10^6 CFU/條），驗證殺滅率≥10^6；

- 清潔驗證：設定殘留限度（如疫苗抗原≤10ppm），采用棉簽擦拭法+HPLC檢測，設備表面微生物≤10CFU/100cm2。

2.偏差響應：

- 若核心區沉降菌≥5CFU/4小時，立即停止生產，啟動“三查”流程（人員操作記錄、設備運行參數、環境監測數據），并對該區域進行奧克泰士強化消毒；

- 污染批次隔離：對污染發生前后30分鐘生產的產品增加檢測項目（如無菌檢查延長至14天，支原體PCR檢測），經質量授權人批準后方可放行。

五、合規性與技術賦能

（一）國際法規對標

- 2025版GMP無菌附錄：落實“污染控制策略（CCS）”，將奧克泰士消毒頻率、濃度等參數納入風險評估，例如B級區人員密集區域消毒頻次從每日1次增加至2次；

- EU GMP Annex 1修訂版：符合“動態監測”要求，在核心區操作人員需穿戴滅菌手套（雙層）+頭套全覆蓋，用奧克泰士消毒，記錄與人員進出記錄聯動，確保數據完整性。

（二）新興技術應用

- 數字孿生模擬：通過模擬潔凈區氣流，優化層流罩位置，減少滅菌盲區；

- 機器人自動化：引入無菌機器人，執行高風險操作（西林瓶上料、軋蓋），機器人表面涂覆抗生物膜涂層（結合奧克泰士消毒，生物膜形成量減少70%）；

- 區塊鏈存證：將消毒記錄、環境監測數據上鏈，確保不可篡改，滿足FDA對數據完整性（DI）的嚴苛要求。

六.奧克泰士殺孢子劑優勢：

l 符合2025GMP要求，符合新規理念，對注射劑/凍干疫苗系統設備友好，不影響設備精密準確性。

l 無殘留、無毒衍生物、對人體健康無害，不影響設備元件、藥品API、包材、輔料穩定性。

l 良好的材料兼容性，可以長期規劃使用。

l 滅菌效率無差異，其主要成分是過氧化氫與銀離子，使用后能夠分解為水和氧氣，不需要后續沖洗。

l 滅菌效期長，滿足生產批次生產時間，確保流程正常進行，進一步保證了生產效率。

針對新規推進，面對注射劑/凍干隱患微生物，非終端滅菌問題，建議采用奧克泰士產品！為生產環境穩定、工作效率、微生物控制保駕護航！我們也將竭誠為您提供專業技術服務：

（1）根據客戶需求，指導和協助客戶建立和完善系統化殘留溶劑、微生物檢驗體系，包括采樣計劃、預防性消毒程序等工作。

（2）指導和協助客戶對實際生產過程中微生物污染進行分析查。

（3）對各類微生物污染問題提供針對性解決方案，指導和協助客戶執行方案直至解決微生物污染問題，提供閉合鏈條式服務。

（4）提供后續管控方案，防范微生物污染的再次發生。

（5）對客戶現用消毒產品/方式的驗證評估提供技術建議。

（6）根據客戶需求，對客戶員工進行微生物學和消毒學方面的技術培訓。