加長超聲波破碎儀的提取方法
1.樣品準備
組織處理:將清洗后的組織用攪切機切碎成小塊,混懸在至少兩倍體積的緩沖液中。
細胞處理:洗去培養液的細胞,混懸在至少兩倍體積的緩沖液中。
濃度與體積控制:過高濃度的樣品可能導致超聲波傳遞效率降低,需適當稀釋,并確保樣品均勻分散。
2.超聲破碎操作
探頭操作:將超聲探頭沒入混懸液內,避免直接接觸容器底部或側壁。
參數設置:總超聲時間約2分鐘,分為4個周期(如4×30秒),周期之間需將樣品置于冰浴中冷卻,防止過熱。
功率與頻率:根據樣品特性選擇合適的超聲波頻率和功率,初次使用建議從低功率開始,逐步調整至最佳參數。
3.冷卻與安全
溫度控制:超聲處理過程中會產生熱量,需配合冰水浴或冷卻裝置,確保樣品溫度穩定。
防護措施:操作時佩戴耳塞或耳罩,防止高強度噪音損傷聽力;避免液體飛濺,防止樣品污染或操作人員受傷。
4.后續處理
離心與分離:超聲破碎后,通過離心分離細胞碎片和上清液,提取目標成分。
重復提取:根據實驗需求,可重復超聲破碎步驟,提高提取效率。
加長超聲波破碎儀的提取原理
1.空化效應
超聲波在液體中傳播時,產生壓力變化,形成微小氣泡。這些氣泡在聲波作用下快速膨脹與收縮,最終在臨界點瞬間崩潰,釋放巨大能量,形成沖擊波和微激波,對細胞壁施加強烈剪切力,導致細胞破裂。
2.機械效應
超聲波的機械振動使液體介質中的物質質點產生高頻震動,增強物質擴散和傳播。輻射壓強沿聲波方向傳播,對物料產生破壞作用,使細胞組織變形,蛋白質變性,促進細胞內容物釋放。
3.熱效應
超聲波在液體中傳播時,能量被物質質點吸收并轉化為熱量,導致局部溫度升高。這種瞬時升溫可加速細胞內成分的溶解,但需通過冷卻措施控制溫度,防止目標成分失活。
4.微環境效應
超聲波在微環境內產生湍動、微擾、界面和聚能等額外效應,擴大物質分子運動速率和穿透力,提高目標成分從固相到液相的傳質速率。
應用與優勢
高效提取:超聲波破碎儀可快速破碎細胞,釋放高純度、高活性的蛋白質、多肽等生物分子,提取效率是傳統方法的10倍以上。
廣泛適用性:適用于動植物組織、細胞、細菌、病毒孢子等生物樣本的破碎,以及乳化、分離、分散、勻化、提取等操作。
靈活調控:超聲時間、功率連續可調,支持創建并儲存多達20組操作程序,滿足不同實驗需求。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。