一、產品概述
CST抗體以高特異性、靈敏度和穩定性著稱,廣泛應用于蛋白質功能研究、信號通路分析及疾病機制探索。其核心產品線包括XP®系列兔單克隆抗體(采用XMT®技術開發)和經嚴格驗證的多克隆抗體,覆蓋腫瘤標志物、磷酸化修飾蛋白、細胞周期調控因子等靶點。
二、產品組成與規格
抗體形式
液體抗體:含50%甘油緩沖液(避免凍融),直接使用無需復溶。
凍干抗體:需用推薦緩沖液(如無菌水或含BSA的PBS)復溶。
包裝規格
常見規格:20μL、100μL、200μL、1mL。
配套試劑:推薦使用CST推薦的封閉液、二抗及顯色試劑(如SignalStain®系列)。
三、儲存條件與有效期
儲存溫度
未開封抗體:-20℃保存(含甘油,保持液態);偶聯抗體(如HRP標記)需4℃保存。
開封后抗體:建議分裝后-20℃保存,避免反復凍融(注:CST不建議分裝,若必須分裝需確保無菌操作)。
有效期
單組分抗體:以管身“Ref:”后的灌裝日期為起始,通常為2年。
試劑盒:以條形碼標簽日期為準,凍干細胞因子產品需在購買后12個月內使用。
四、使用方法
1. 實驗前準備
查閱說明書:確認抗體的應用范圍(如WB、IHC、IF)、推薦稀釋比例及種屬反應性(如人、小鼠、大鼠)。
樣本處理:
細胞裂解液:推薦使用CST專用裂解緩沖液(如RIPA Buffer),加入蛋白酶/磷酸酶抑制劑。
組織樣本:福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)樣本需按說明書進行抗原修復。
2. 推薦操作流程
Western Blot(WB)
上樣量:20-30μg總蛋白,使用12% SDS-PAGE膠分離。
轉膜:濕轉法,推薦0.2μm硝酸纖維素膜(NC膜)。
封閉:5%脫脂牛奶(貨號#9999)室溫封閉1小時。
一抗孵育:4℃過夜(磷酸化抗體需延長反應時間)。
二抗:抗兔/鼠HRP標記二抗(貨號#7074/#7076),室溫孵育1小時。
免疫組化(IHC)
抗原修復:推薦檸檬酸緩沖液(pH6.0)高壓修復。
阻斷:3% H?O?處理10分鐘,5% BSA封閉。
顯色:DAB或SignalStain®顯色試劑。
五、注意事項
購買渠道
CST代理——天津益元利康生物科技有限公司,提供CST抗體、試劑盒等,確保正品及售后支持。
抗體分裝禁忌
分裝可能導致濃度不均、污染或活性損失,CST不承擔分裝后質量問題。
實驗優化建議
磷酸化抗體:需嚴格驗證樣本刺激條件(如EGF處理15分鐘激活Akt)。
多色流式:搭配CompBeads微球調節熒光補償,避免通道干擾。
常見問題排查
無信號:檢查樣本中靶蛋白表達水平(參考UniProt或BioGPS數據庫),確認抗體稀釋比例及孵育時間。
高背景:縮短封閉時間,更換封閉液(如BSA替代脫脂牛奶)。
附錄:推薦配套試劑
試劑類型 | 推薦產品(貨號) | 應用場景 |
---|---|---|
封閉液 | SignalStain® Blocking Buffer (#12454) | WB/IHC/IF |
二抗 | Anti-Rabbit IgG HRP (#7074) | WB/IF |
顯色試劑 | SignalStain® DAB (#8059) | IHC |
注:更多產品信息請聯系天津益元利康生物科技有限公司。
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