一、分類

假單胞菌屬歸于假單胞菌科，有200余種細菌，其DNA的G+C的摩爾分數為58％～71％，主要包括銅綠假單胞菌（P.aeruginosa) ,熒光假單胞菌（P.fluorescens)、惡臭假單胞菌（P.putica)、斯氏假單胞菌（P.stutizeri)、產堿假單胞菌（P.alcaligenes）等。

二、生物學特性

假單胞菌屬為革蘭陰性桿菌，菌體直或微彎，無芽胞、無莢膜，有單鞭毛（銅綠假單胞菌、斯氏假單胞菌、產堿假單胞菌）或叢鞭毛（熒光假單胞菌、惡臭假單胞菌），運動活潑。

本屬細菌專性需氧，生長溫度范圍廣，生長溫度35℃（熒光假單胞菌25℃），少數細菌可在4℃（熒光假單胞菌）或42℃（銅綠假單胞菌、斯氏假單胞菌）生長，可以此來鑒別細菌。細菌生長的pH 5.0～9.0，pH值為7.0。營養要求不高，在普通培養基上均可生長，可產生多種水溶性色素，主要有綠膿素（pyocyanin)和青膿素（pyoverdin)，青膿素在360 nm紫外光下可發出黃綠色熒光，故又稱熒光素。各種假單胞菌產生的色素見表17-2。細菌在液體培養基中呈混濁生長，常在其表面形成菌膜。在麥康凱平板上生長良好，各種菌在血平板上形成不同的菌落特征，根據生長特性可進行初步鑒定。

銅綠假單胞菌在普通平板上形成的菌落扁平濕潤、大小不一、邊緣不整齊、常呈融合狀生長，所產生的綠膿素和熒光素使培養基被染成藍綠色或黃綠色，從臨床標本中分離的菌株有80％～90％可產生綠膿素或熒光素。在血平板上生長后有生姜樣氣味，形成扁平濕潤、有金屬光澤的菌落，常呈β溶血。在麥康凱瓊脂培養基上，24 h可形成半透明菌落，48 h后菌落中心呈棕綠色。來自肺囊性纖維化患者的菌株常形成M型菌落。

熒光假單胞菌在血平板上30℃孵育24 h后形成灰白色、扁平稍隆起、濕潤、光滑、邊緣整齊的菌落，無溶血，挑取菌落呈黏絲狀。

斯氏假單胞菌在血平板上24 h長出1 mm大小菌落，大多數菌落干燥、有皺紋、粗糙、扁平，淡黃色或黃棕色，堅韌而黏附平板；少數菌落光滑、濕潤，大部分產生透明溶血環。多次轉種后光滑型菌落增多，呈遷徙生長及擴散。

在血平板上產堿假單胞菌和惡臭假單胞菌都形成光滑、濕潤、邊緣整齊的灰色菌落，無溶血。

三、臨床意義

假單胞菌屬分布廣泛，土壤、水和空氣中均有存在，屬于條件致病菌。人感染主要來源于環境、污染的醫療器械、輸液或注射等，成為醫院感染的主要病原菌。在人類非發酵菌感染中，假單胞菌屬占70％～80％，主要為銅綠假單胞菌，其次為惡臭假單胞菌、熒光假單胞菌等。

銅綠假單胞菌不僅廣泛存在于環境中，也存在于正常人體的腸道、皮膚及外耳道，當宿主正常的防御機制被改變或損傷時，如燒傷、留置導尿管、氣管切開插管等，以及免疫機制缺損時，如患者等，可導致皮膚、呼吸道、泌尿道、眼部等感染。當細菌毒力強、數量多而機體抵抗力降低時，細菌可在血中繁殖引起敗血癥、腦膜炎。

從傷口、痰、胸腔積液、尿或血液中可分離出熒光假單胞菌。由于熒光假單胞菌具有嗜冷性，可在血庫儲存的血中繁殖，若輸入含有此種細菌的庫存血液或血制品，可導致敗血癥、感染性休克或血管內凝血等嚴重后果，其內毒素的磷脂部分可導致輸血后不可逆的休克。

惡臭假單胞菌為魚的一種致病菌，常從的魚中檢出，也可作為人類咽部的正常菌群，是人類少見的條件致病菌，偶從少、類尿道感染、皮膚感染和骨髓炎標本中分離出，分泌物有腥臭味。惡臭假單胞菌感染通常病情較重，因為該菌自溶后釋放出內毒素而致中毒癥狀。

斯氏假單胞菌在人類的呼吸道、泌尿道均可發現，為條件致病菌，可引起原發性或繼發性感染，如呼吸道感染、中耳炎、關節炎、尿路感染及敗血癥等。

產堿假單胞菌廣泛存在于多種水源中，是醫療用水污染的主要原因。產堿假單胞菌如污染新生兒溫箱濕化用水和氧氣濕化用水，極容易導致新生兒呼吸道感染甚至敗血癥等。產堿假單胞菌還可引起化膿性腦膜炎、尿道炎、肺炎等感染性疾病。

四、微生物學檢驗

1、檢驗程序非發酵菌檢驗程序見圖17-1。

圖17-1非發酵菌檢驗程序

2、標本采集假單胞菌屬感染常見標本有血液、腦脊液、胸腹水、膿液、分泌液、痰、尿液等。進行醫院感染監測時，標本主要為病區或手術室的空氣、水、地面、把手、醫療診斷器械及生活用品。

3、直接顯微鏡檢查取標本直接涂片、革蘭染色，鏡下可見革蘭陰性桿菌，散在排列，無芽胞。

4、分離培養臨床感染標本一般直接接種于血平板及麥康凱平板，血液、腦脊液標本經增菌后再轉種于血平板。

5、鑒定假單胞菌屬的主要特征：革蘭陰性桿菌，專性需氧，在血平板和麥康凱培養基上生長良好，通常產生明顯的水溶性色素。氧化酶陽性，葡萄糖氧化發酵試驗(O/F試驗）為氧化型或產堿型，端生單或叢鞭毛，據此可與非發酵菌其他屬相區別。進一步做系列生化試驗進行菌種鑒定。具體見表17-3。

表17-3臨床常見假單胞菌的鑒定特征

注：＋表示90％以上陽性；一表示90％以上陰性；V表示不定。

在臨床微生物實驗室，假單胞菌屬細菌的鑒定常采用商品化的試劑盒，以及全自動或半自動的細菌鑒定系統。

從臨床標本中分離出銅綠假單胞菌，需要排除污染，從患者血液及無菌體液、尿液中分離到本菌，特別是反復檢出者，結合臨床表現即可確定為病原菌感染。需連續三次痰培養陽性才能確立銅綠假單胞菌下呼吸道感染，如患者無感染的臨床表現，雖然分離到銅綠假單胞菌亦應作為正常菌群。

6、藥物敏感試驗 假單胞菌屬的細菌對有些抗生素天然耐藥，臨床治療假單胞菌感染的抗菌藥物主要有三類：β-內酰胺類、氨基糖苷類和喹諾酮類。按美國臨床實驗室標準研究所(CLSI）推薦，銅綠假單胞菌藥敏試驗可選用Kirby-Bauer法。

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