上海雅吉生物的GST標簽蛋白純化試劑盒(GST-tag Protein Purification Kit)，俗稱GST柱試劑盒，是一種采用了新型的BeyoGold™ GST-tag Purification Resin，并能簡單、快速、高效并且高特異性地純化GST標簽蛋白的試劑盒。
      試劑盒提供了GST標簽蛋白純化所需的相關試劑和親和層析柱空柱管，為GST標簽蛋白的純化帶來了極大的便利。
      GST，即谷胱甘肽-S-轉移酶，與目的蛋白融合表達后，被稱為GST標簽重組蛋白、GST標簽蛋白或GST融合蛋白。GST標簽重組蛋白可以通過GST特異性地結合到BeyoGold™ GST-tag Purification Resin，而其它蛋白則不能被結合，含GST標簽的重組蛋白可被過量的還原型谷胱甘肽(GSH)溶液洗脫，從而實現GST標簽蛋白的分離和純化。由于純化過程始終保持在溫和的非變性條件下，得到的目的蛋白可以保持其自身的生物學活性，因此可以用于常規的結構和功能研究、抗體制備、以及蛋白與蛋白相互作用、蛋白與核酸相互作用等方面的研究。
      GST標簽蛋白純化試劑盒不僅可以用于大腸桿菌表達的GST標簽重組蛋白的純化，也可以用于哺乳動物細胞、昆蟲細胞及桿狀病毒等其它表達系統中表達的GST標簽重組蛋白。
      GST標簽重組蛋白在大腸桿菌中表達時具有可溶性高，并且容易保持目的蛋白完整活性等優點。許多真核蛋白在大腸桿菌中是以包涵體的形式表達的，但當它們在大腸桿菌中與GST融合表達時，相當一部分可以實現可溶性表達，從而有利于后續的純化。
      如果在GST標簽和目的蛋白之間含有位點特異性的蛋白酶識別位點，如PreScission Protease, TEV Protease或Thrombin等，則可用相應的蛋白酶切除GST標簽。
      通常在目的蛋白的N端加上GST標簽可以保留GST的酶活性，從而便于使用BeyoGold™ GST-tag Purification Resin進行GST標簽重組蛋白的純化。
      本試劑盒中的BeyoGold™ GST-tag Purification Resin采用了一種高度交聯的6%瓊脂糖凝膠(Sepharose CL-6B)為基質，并使用了進一步優化的接臂和GSH偶聯技術，可以高容量、高特異性地結合GST標簽重組蛋白。和目前市售的大多數同類產品相比，非特異性蛋白結合更低，耐受壓力更強，GSH的偶聯更加穩定。
      BeyoGold™ GST-tag Purification Resin凝膠的顆粒直徑為45-165μm。可耐受的zui大壓力為0.025MPa，約合5.8psi。采用固定流速進行蛋白純化時的推薦流速為0.5ml/min。
      BeyoGold™ GST-tag Purification Resin儲存在20%乙醇中，10ml總體積中5ml為凝膠，5ml為液體。使用時宜把凝膠充分重懸后再吸取。
      BeyoGold™ GST-tag Purification Resin對含GST標簽重組蛋白的結合容量大，其對GSTzui大結合量為5-6mg蛋白/毫升凝膠，與的同類產品結合容量相當。實際使用時的zui大結合量取決于待純化的GST標簽重組蛋白的分子量大小，分子量越大則zui大結合容量越大，分子量越小則zui大結合容量越小。對于目的蛋白分子量為50kD的GST標簽重組蛋白，每毫升凝膠的實際zui大純化量約為8-12mg，對于目的蛋白分子量為100kD的GST標簽重組蛋白，每毫升凝膠的實際zui大純化量約為12-18mg。但對于分子量相同的蛋白，也會因為蛋白本身特性的不同，結合的zui大容量也會有所不同。
      一個包裝的本產品zui多可純化10種帶有GST標簽的重組蛋白，每種蛋白的zui大純化量約為12mg。對于目的蛋白分子量為50kD的GST標簽重組蛋白，一個包裝的本產品實際zui多可純化10種約4-6mg蛋白。在不使用親和層析柱空柱管的情況下，參考本說明書，本試劑盒足夠進行500次的小量GST標簽蛋白純化。
包裝清單：
產品編號    產品名稱    包裝
P2262-1    BeyoGold™ GST-tag Purification Resin    10ml
P2262-2    裂解緩沖液    180ml
P2262-3    洗脫緩沖液(需添加GSH)    60ml
P2262-4    GSH    184mg
P2262-5    溶菌酶    60mg
P2262-6    親和層析柱空柱管(3毫升)    10套
—    說明書    1份
保存條件：
      4℃保存，至少一年有效。除BeyoGold™ GST-tag Purification Resin外，其余均可以-20℃保存。
注意事項：
      請勿在-20℃或更低溫度冷凍保存BeyoGold™ GST-tag Purification Resin。
      BeyoGold™ GST-tag Purification Resin保存和純化過程中應始終保持凝膠濕潤。
      有多種不同容量的親和層析柱空柱管(FCL01/FCL03/FCL06/FCL12/FCL30/FCL60)，可以和本產品配合使用。
      若離心不能*除去蛋白樣品中的不溶物，可以將樣品溶液用0.45μm的濾膜過濾。
      GST標簽蛋白的純化應始終保持在非變性條件下，如果融合蛋白以包涵體形式表達，在使用8M尿素或6M鹽酸胍溶解包涵體后，需要通過透析去除尿素和鹽酸胍并使蛋白復性后才能使用本產品進行純化。
      蛋白樣品收集后宜盡快完成純化工作，并應始終放置在4℃或冰浴，以減緩蛋白降解。為有效抑制蛋白降解，可以在裂解液中添加適量的蛋白酶抑制劑混合物，例如P1025/P1026蛋白酶抑制劑混合物(細菌抽提用)，或P1005/P1006蛋白酶抑制劑混合物(通用型)。
      僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。