目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學試劑>>溶液>> 高效核酸雜交液(Oligo 探針專用)
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10mL |
---|---|---|---|
貨號 | XY-D-1743 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | / |
保存條件 | -20℃ | 有效期 | 1年 |
產品簡介:
核酸雜交是指用一種標記的核酸探針與印跡膜上的核酸進行雜交,由此檢測印跡膜上是否存在與探針同源的核酸分子。當探針是 Oligo 分子時,需要使用專門的核酸雜交液,本產品就是為此開發的 Oligo 探針專用雜交液。
產品特點:
1.即開即用,使用方便。
2.既可以用于 DNA Oligo 探針雜交,也可以用于 RNA Oligo 探針雜交。
3.本產品足夠 5 平方厘米印跡膜的 10 次核酸雜交。
4.高效核酸雜交液(Oligo 探針專用)只可用于科研。
產品參數:
成分規格包裝
高效核酸雜液(Oligo 探針專用)10 mL10 mL 本色瓶
使用手冊1 份無
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
自備試劑
印跡膜,Oligo 探針,6×SSC,2×SSC,0.1×SSC
使用方法:
一、雜交溫度的確定
1.Oligo 探針的最佳雜交溫度一般比Tm 低5℃。計算Tm 的公式是Tm=GC數量×4℃+AT 數量×2℃。但由于 Oligo 較短,更容易受各種因素影響
(如錯配率、修飾堿基比例等),所以最佳溫度可能還需要適度摸索和優化。Oligo 探針可以在室溫洗膜。
二、預雜交
2.將轉膜所得的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6×SSC 溶液中,使其充分濕潤。
3.將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋最好預先封口,再剪掉一 角,留一個小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 本產品的比例沿小口加入本產品,然后用塑料封口機將口封牢。
4.將此塑料袋浸沒入溫度設定在最佳雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中, 保溫 1-2 小時,延長到 12-16 小時亦可。注意保溫過程中塑料袋應在不停的搖動狀態中,使本產品與印跡膜充分接觸。
三、雜交
5.將 Oligo 探針加入到完成了預雜交的雜交袋中(先用剪刀剪一小口,加入 Oligo 探針后用熱封機封口)。Oligo 探針的加入量視探針標記效率而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷貝基因,Oligo 探針的加入量應加大,而對于檢測克隆的基因片段,則 Oligo探針的量可減少。如果是放射性 Oligo 探針,應將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免雜交袋發生遺漏、污染工作環境。
6.在選定的雜交溫度下繼續保溫,時間一般為 6-12 小時。四、洗膜
7.雜交完畢,取出塑料袋,剪去一角,倒出所有的含 Oligo 探針的雜交液。
此含 Oligo 探針的雜交液可以多次使用。
8.剪開雜交袋,用鑷子取出印跡膜,浸沒于大量的 2×SSC(含 0.5 % SDS)溶液中,室溫下振蕩漂洗 15 分鐘。洗膜時一定不要使印跡膜干燥。
9.重復上步操作一次。
10.將印跡膜轉移至 0.1×SSC(含 0.1% SDS)溶液中,在計算好的洗膜溫度下振蕩漂洗 30 分鐘至 1 小時。
11.重復上步操作一次。
12.將印跡膜轉移到濾紙上,吸去表面液體后印跡膜即可用于后續檢測。
選擇我們的高效核酸雜交液(Oligo 探針專用),就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護航!