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產品簡介：

本產品是 5×被動裂解液（Passive Lysis Buffer，PLB），專門用于裂解培養細胞，還可用于后續檢測裂解物中熒光酶活性。

產品特點：

1.可原位對貼壁培養細胞進行快速裂解，無需對貼壁細胞進行刮擦或凍融循環。

2.螢火蟲熒光素酶的底物熒光素和海腎熒光素酶的底物腔腸素在本產品中的自發光極其微弱，故使用本產品得到的細胞裂解物可以直接用于后續的螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶活性測定。

3.跟多個廠家的熒光酶檢測試劑盒兼容。

4.本產品只能用于科研。

產品參數：

成份規格包裝

5×被動 裂解液30 mL30 mL 本色瓶

使用手冊1 份無

運輸及保存

低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

雙蒸水，PBS 緩沖液

使用方法：

一、對 6 孔板-96 孔板中的培養細胞裂解

1.將5×被動 裂解液用蒸餾水稀釋至1×備用。雖然稀釋后的1×被動裂解液可以在4℃放置1個月，但最好現用現配，用多少配多少。

2.在多孔板中培養的細胞生長到不超過95%的匯合度的時候，吸棄培養基， 小心用自備的PBS緩沖液洗滌細胞一次。

3.離心干甩一次，小心去除多孔板中殘留的液體。

4.每孔加入適量的1×被動裂解液，用移液槍吹打打散細胞。不同多孔板的1×被動裂解液加入量請參考下表：

5.室溫搖床上緩慢搖15分鐘進行細胞裂解。對過度生長的細胞，或少數沒有過度生長的細胞株，裂解時間可能需要延長1倍。熒光酶在1×被動裂

解液中比較穩定，活性并不會降低。

6. 可以直接在多孔板中進行后續的熒光酶檢測。如果需要長期保存，可以將細胞裂解液吸至1.5 mL離心管，4℃ 12000 rpm（13200 g）離心 10分鐘，將上清液（含熒光酶）轉移到新管中。此上清液常溫可以放置6 小時，冰上可以放置16小時，-20℃可以放置1個月，-80℃可以放置半年以上。用此上清液進行后續實驗時，凍融次數不要超過3次，否則熒光酶的活性會逐漸降低。

二、對 12 孔板-培養瓶中的培養細胞裂解

1.將5×被動 裂解液用蒸餾水稀釋至1×備用。雖然稀釋后的被動裂解液可以在4℃放置1個月，但最好現用現配，用多少配多少。

2.在多孔板或培養瓶中培養的細胞生長到不超過95%的匯合度的時候，吸棄培養基，小心用自備的PBS洗滌細胞一次。

3.離心干甩一次，小心去除多孔板或培養瓶中殘留的液體。

4.每孔或每個培養瓶中加入適量的1×被動裂解液，用移液槍吹打，打散細胞。不同多孔板或培養瓶的1×被動裂解液加入量請參考下表：

5.用一次性細胞刮子充分刮落貼壁細胞。

6.傾斜多孔板或培養瓶，待裂解物匯集后，再用移液搶充分吹打數次。

7.將裂解物轉移到新的容器中，直接進行后續測試。如果需要長期保存， 可以將細胞裂解液吸至1.5 mL離心管，4℃ 12000 rpm（13200 g）離心10分鐘，將上清液（含熒光酶）轉移到新管中。此上清液常溫可以放置6小時，冰上可以放置16小時，-20℃可以放置1個月，-80℃可以放置半年以上。用此上清液進行后續實驗時，凍融次數不要超過3次，否則熒光酶的活性會逐漸降低。

選擇我們的5×被動裂解液，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！